ЦИРКУЛИРУЮЩАЯ ВНЕКЛЕТОЧНАЯ ДНК В СИСТЕМНЫХ МЕХАНИЗМАХ СТРЕССОРНЫХ РЕАКЦИЙ
Бесплатно
Основная коллекция
Издательство:
НИИ ноpмальной физиологии им. П.К. Анохина
Год издания: 2015
Кол-во страниц: 4
Дополнительно
Скопировать запись
Фрагмент текстового слоя документа размещен для индексирующих роботов.
Для полноценной работы с документом, пожалуйста, перейдите в
ридер.
ЦИРКУЛИРУЮЩАЯ ВНЕКЛЕТОЧНАЯ ДНК В СИСТЕМНЫХ МЕХАНИЗМАХ СТРЕССОРНЫХ РЕАКЦИЙ Конорова И.Л., Горностаева Г.В., Ершова Е.С., Костюк С.В., Вейко Н.Н., Варакин Ю.Я. ФГБНУ «Научный центр неврологии» (руководитель – член-корр. РАН, М.А.Пирадов), Москва, Россия konorova.irina@yandex.ru Ключевые слова: внеклеточная ДНК, стресс, эссенциальная артериальная гипертензия Одной из реакций сердечно-сосудистой системы на стресс является повышение уровня АД, в хронических случаях приводящее к развитию эссенциальной артериальной гипертензии (ЭАГ). В последнее время патогенез ЭАГ связывают с воспалением [4]. Критическую роль в инициации врожденного иммунитета и воспалительных реакций играют Toll-подобные рецепторы, включая рецептор 9 типа (TLR9) [2], который распознаёт неметилированные CpG-богатые последовательности бактериальной и эндогенной ДНК [3]. Мы обнаружили, что у больных ЭАГ циркулирующая в крови внеклеточная ДНК (цДНК) обогащена фрагментами транскрибируемой области рибосомного повтора (рДНК), который является маркером CpGбогатых последовательностей генома [5]. В экспериментах in vivo показано, что только у животных, склонных к эмоциональному стрессу, пул цДНК обогащён рДНК, а при стрессе значительно повышается концентрация цДНК [1]. В опытах in vitro показано, что рДНК в зависимости от концентрации может либо усиливать, либо подавлять синтез NO эндотелиальными и иммунокомпетентными клетками. Целью настоящего исследования было выяснение вопроса, участвуют ли CpG-богатые последовательности генома, накапливающиеся в пуле цДНК, в системных механизмах формирования ЭАГ. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ. Материалом служили образцы крови 25 здоровых доноров и 18 больных ЭАГ Iи II-й степени по уровню АД (классификация ВОЗ-МОАГ, 1999), неотягощенной атеросклерозом, проходивших обследование и лечение в ФГБНУ «Научный центр неврологии» (ФГБНУ НЦН). От каждого донора было получено письменное согласие на забор крови и использование результатов обследования в научных целях. Дизайн исследования образцов крови рассмотрен и одобрен этической комиссией ФГБНУ НЦН. В плазме крови исследовали концентрацию цДНК методом флуориметрии; концентрацию рДНК и содержание рДНК в 1 нг цДНК – количественной нерадиоактивной дот гибридизацией; сопротивление току крови (СТК) – по времени протекания образцов через стеклянный капилляр в стандартных условиях турбулентного потока (Re=8000); агрегацию тромбоцитов, индуцируемую адреналином (АТадр) – на лазерном агрегометре «Биола» (Россия). В опытах in vitro методами флуоресцентной микроскопии и спектрофлуориметрии, используя флуоресцентный краситель CuFL, оценивали количество NO в культуре эндотелиальных клеток (HUVEC) после добавления образцов цДНК от здоровых доноров и больных ЭАГ. Обработку данных проводили в программе “Statistica 6.0”, результаты - в виде Me[25%;75%].