Применение ВЭЖХ в судебно-медицинской экспертизе и криминалистике

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Forensic Applications of

High
Performance
Liquid
Chromatography

Shirley Bayne
Michelle Carlin

CRC Press is an imprint of the
Taylor & Francis Group, an informa business

Boca Raton   London   New York

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Санкт-Петербург
2021

Ширли Бейн, Мишель Карлин

Применение ВЭЖХ 
в судебно-медицинской 
экспертизе и криминалистике

Практическое руководство

Перевод с английского языка
под редакцией Б. П. Лапина

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

УДК  543.544.5
ББК 24.4я73
П75

Ширли Бейн, Мишель Карлин
П75 Применение ВЭЖХ в судебно-медицинской экспертизе и криминалистике. 
Практическое руководство / пер. с англ. яз. под ред. Б. П. Лапина. —  СПб.: 
ЦОП «Профессия», 2021. — 288 с., цв. ил.

ISBN 978-5-91884-123-5
ISBN 978-1-4200-9191-5 (англ.)

Рассмотрены теоретические основы и практическое использование метода ВЭЖХ 
в судебно-медицинской экспертизе (СМЭ) и криминалистике. Даны основы, выбор и оценка 
метода ВЭЖХ с обращенной фазой; практика разделения и обнаружения; требования 
к успешному анализу и качеству лабораторных работ; устранение неисправностей систем 
и ошибочных результатов. В специальной главе приведен обзор практических решений 
в областях судебной медицины и криминалистики: анализ наркотиков, токсинов, взрывчатых 
веществ, красителей и загрязнителей пищевых продуктов и окружающей среды.
Руководство предназначено для экспертов-аналитиков по применению ВЭЖХ в области 
СМЭ, а также в качестве учебного пособия для студентов специальных курсов профильных 
специальностей.

ББК 24.4я73
УДК 543.544.5 

© All Rights Reserved.  Authorised translation from the English language edition 
published by CRC Press, a member of the Taylor & Francis Group LLC
 Все права защищены. Никакая часть данной книги не может быть воспроизведена в какой 
бы то ни было форме без письменного разрешения владельцев авторских прав.

Информация, содержащаяся в данной книге, получена из источников, рассматриваемых издательством 
как надежные. Тем не менее, имея в виду возможные человеческие или технические ошибки, 
издательство не может гарантировать абсолютную точность и полноту приводимых сведений 
и не несет ответственности за возможные ошибки, связанные с использованием книги.

ISBN 978-1-4200-9191-5 (англ.) 
© Taylor & Francis Group, LLC, 2010
ISBN 978-5-91884-123-5 
© ЦОП «Профессия», 2021 
 

© Перевод, оформление: ЦОП «Профессия», 2021

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

ОГЛАВЛЕНИЕ

Предисловие . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9

Сведения об авторах . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12

Глава 1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13
История развития хроматографии . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13
Основное оборудование . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .14
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16

Глава 2.  Основные принципы высокоэффективной  
жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) . . . . . . . . . . . . . . . . 17
Теория хроматографии . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .17
Химическая связь и полярность. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50
Вопросы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .52
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .55

Глава 3. 
Подготовка подвижной фазы,  пользование  
буферными растворами и подготовка образцов . . . . . . 56
Подготовка подвижной фазы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .56
Буферные растворы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .61
Подготовка образцов и стандартов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .69
Введение образца; пользование автоматическими пробоотборниками . . . .83
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .86
Вопросы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .87
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .89

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Оглавление

Глава 4. Виды разделения . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 91
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .91
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .99
Вопросы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .100
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .100

Глава 5.  Системы обнаружения . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 101
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .101
Теоретические основы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .101
Сравнение детектора, регистрирующего поглощение света 
в ультрафиолетовой и (или) видимой областях света,  
с детектором с диодной матрицей . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .115
Электрохимические детекторы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .116
Масс-спектрометрия . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .117
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .126
Вопросы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .127
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .128

Глава 6  
Разработка метода ВЭЖХ-разделения на колонках 
с обращенной фазой . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 129
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .129
Состав образца. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .129
С помощью какой колонки выполнять разделение? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .134
Выбор подвижной фазы. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .143
Автоматическая разработка метода . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .145
Стратегия разработки метода. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .146
Рабочий пример разработки метода. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .158
Справочная литература . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .160
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .160

Глава 7. 
Пригодность системы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 162
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .162
Пригодность системы. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .162
Справочная литература . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .165

Глава 8. 
Квалификация, аттестация и проверка . . . . . . . . . . . . . 166
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .166
Правила получения надежных результатов аналитических измерений . . .166

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Оглавление

Оценка недостоверности измерений, источников ошибок и важность  
статистического анализа данных. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .169
Квалификация оборудования . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .173
Аттестация метода . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .177
Проверка метода . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .191
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .192
Вопросы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .193
Справочная литература . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .194
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .194

Глава 9. 
Системы контроля качества. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 195
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .195
К чему сводится контроль качества?. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .195
Внедрение системы гарантии качества . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .198
Как образом мы можем гарантировать качество работы наших  
лабораторий?. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .199
Система менеджмента качества. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .201
Аккредитация . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .202
Проведение аудиторских проверок. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .203
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .204
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .204

Глава 10. Проблемы, возникающие при получении разделений 
с помощью ВЭЖХ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 205
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .205
Указания по поиску причин возникших затруднений. . . . . . . . . . . . . . . . . . .206
Набор инструментов и запасных частей . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .225
Профилактическое обслуживание . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .226
Уход за колонкой. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .227
Сводка ключевых моментов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .229
Дополнительная литература. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .233

Глава 11. Решение прикладных задач в судебной медицине 
и криминалистике с помощью ВЭЖХ. . . . . . . . . . . . . . . 234
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .234
Анализ наркотиков. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .234
Токсикологический анализ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .239
Анализ красителей . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .242

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Оглавление

Анализ взрывчатых веществ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .244
Пищевые продукты и загрязнители окружающей среды . . . . . . . . . . . . . . . .247
Справочная литература . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .252

Словарь терминов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 255

Примечания и пояснения,  добавленные редактором. . . . . . . . . . 261
Справочная литература . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .284

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Предисловие

Эта книга написана для студентов университетов, изучающих аналитическую, 
прикладную, судебную химию или другие дисциплины, в предметный 
план курса которых входит тема высокоэффективной жидкостной хроматографии (
ВЭЖХ). Целью книги является пояснение ВЭЖХ с точки зрения судебно- 
медицинской и криминалистической экспертизы.
Рассматриваются примеры, связанные с задачами анализа реальных образцов 
в судебно- медицинских и криминалистических лабораториях. Мы старались 
сбалансировать обсуждение способов решения практических прикладных задач 
с теоретическими соображениями, имеющими отношение к проведению анализов 
с помощью высокоэффективных жидкостных хроматографов. Книга вовлекает 
читателя в путешествие по миру ВЭЖХ. Она уместна и для новичков, и для аспирантов, 
и для тех, кто уже находится на ранних этапах карьеры работы в областях 
судебной медицины и криминалистики.
Многие из прикладных судебно- медицинских и криминалистических задач 
могут быть решены благодаря хроматографическим разделениям на колонках 
с обращенной фазой. Мы выбрали примеры реализации именно этого вида ВЭЖХ, 
поскольку он чаще всего используется. Каждый из разделов книги содержит теоретические 
обсуждения, рассмотрение примеров, когда они уместны, краткое 
подведение итогов; читателю задается целый ряд вопросов, если они сочтены 
необходимыми, и, наконец, приводятся ссылки на книги и журнальные статьи, 
которые, как мы полагаем, дадут более полное представление о каждой из затронутых 
тем. Мы постарались сделать эту книгу максимально краткой, но все же 
предоставляющей достаточную информацию для того, чтобы читатель мог полу-
чить необходимые знания быстро и эффективно.
В главе 1 представлена краткая история развития ВЭЖХ, поскольку, как мы 
полагаем, это важно для понимания причин быстрого совершенствования такого 
способа анализов за относительно короткий период времени. Мы надеемся, что 
эти сведения побудят читателей к новаторству и к использованию огромных воз-
можностей такой непрерывно развивающейся области знаний. Мы предоставили 
только моментальный снимок ситуации.
В главе 2 мы переходим к теории процесса получения разделений. Прежде чем 
можно будет сделать  какие- нибудь выводы о возможностях анализа, необходимо 
сперва получить хоть малое представление об используемых процессах. Только 
после этого можно будет понять, что  что-то пошло не так, и исправить ситуацию. 
Работы в областях судебной медицины и криминалистики требуют строгого под-
хода к анализу доказательств; итоги ошибок имеют далеко идущие последствия. 
Главные хроматографические процессы рассматриваются наряду с обсуждением 
основополагающей теории химии.
В главе 3 уделяется внимание некоторым основным требованиям, удовле-
творение которых гарантирует успешность анализа. В частности, требованиям 
к подготовке образцов и подвижной фазы. Мы рассматриваем ряд ограничений, 
связанных с практическими этапами реализации анализа с помощью ВЭЖХ, 

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Предисловие

и предоставляем сведения о наилучших современных подходах к выполнению 
работ. 
В главе 4 обсуждаются различные режимы хроматографического разделения, 
которыми можно пользоваться в судебно- медицинских и криминалистических 
лабораториях. Мы признаём, что существуют и другие технологии химического 
разделения, но они находятся вне рамок этого учебного пособия. Фокусируем 
внимание на пользовании колонками с обращенной фазой, с обычной фазой 
и на ионообменной хроматографии, поскольку именно такие подходы способ-
ствуют решению большинства возникающих прикладных задач. 
В главе 5 обсуждаются варианты обнаружения. Рассматриваются те, которые 
лучше всего подходят к решению задач в областях судебной медицины и крими-
налистики. 
В главе 6 мы переходим в мир разработки методов ВЭЖХ. По описанным 
выше причинам было решено уделить внимание разделению на колонках 
с обращенной фазой. Такой подход дает нам возможность применить теорети-
ческие сведения, заимствованные из предыдущих разделов, к практическим 
этапам выполнения анализов с помощью ВЭЖХ. Кроме того, этот раздел позво-
лил более подробно обсудить многие подлежащие учету факторы и последствия 
возникновения различных проблем в рассматриваемой сфере деятельности. 
В главах 7 и 8 мы показываем, как можно гарантировать, что предложенная 
нами методология даст правдивую информацию о составе анализируемых образ-
цов. Для получения таких результатов оператору требуется знание и других под-
ходов к подтверждению итогов анализов, выполненных с помощью ВЭЖХ (таких 
приемов, как процессы аттестации, квалификации и оценки ошибок).
Глава 9 посвящена общим показателям качества выполняемых в лаборатории 
работ; такая теоретическая оценка может быть применена в большой степени 
к любому аналитическому методу. Работу большинства лабораторий органи-
зуют с использованием по меньшей мере нескольких из критериев, обсужден-
ных в этой главе.
В главе 10 обсуждаются способы поиска причин затруднений, обнаружив-
шихся при пользовании высокоэффективными жидкостными хроматографами 
и методами анализа. Крайне важно, чтобы любой аналитик, сообщающий службе 
уголовного преследования о полученных результатах (в связи с предполагаемым 
преступлением), был на 100 процентов уверен в правильности данных анализа. 
Гарантировать обеспечение такого требования можно только при понимании, 
что  что-то могло быть сделано неправильно, и при способности внести исправ-
ления. В этой главе мы поясняем ряд обычных проблем, возникающих при поль-
зовании методами ВЭЖХ, предлагаем варианты возможных решений на каждом 
из этапов работ.
Глава 11 посвящена более подробному рассмотрению некоторых из приклад-
ных задач, решаемых в судебной медицине и криминалистике с помощью ВЭЖХ. 
Описаны самые типичные виды анализов. Мы признаем возможность их исполь-
зования, но показываем, что методы высокоэффективной жидкостной хромато-
графии и исследований, выполняемых в судебно- медицинских и криминалисти-
ческих лабораториях, являются подходящими для выполнения большинства работ.

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Предисловие

Мы надеемся, что эта книга будет полезна на протяжении всего периода обуче-
ния, желаем всем успехов в работе.
Мы хотим поблагодарить наших родственников и друзей, проявлявших пони-
мание и приверженность делу, помогавших написать эту книгу. Кроме того, выра-
жаем признательность названным далее людям за затраты их ценного времени 
и желание поделиться важным опытом на этапе редактирования (мы очень ценим 
их проницательные комментарии): доктору Джозефу Маккгинесу, Хелен Кодж-
сон, Дугласу Макклеллану, Эду Людкину и Стивену Солу. Благодарим за ценную 
помощь и руководителя наших студенческих проектов Оливера Вайсса. И, нако-
нец, мы хотели бы выразить особую благодарность доктору Лиаму О′Хара за его 
вклад, навыки и знания.
Ширли Бейн 
Мишель Карлин

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Сведения об авторах

Ширли Бейн изучала прикладную химию в Нькасле-эпон- Тайн и получила 
диплом с отличием. Ее карьера началась с работы в Лаборатории испытаний 
лекарственных средств (MTL), подчиненной Королевскому фармацевтическому 
обществу Великобритании (г. Эдинбург), где Ширли имела возможность поль-
зоваться разнообразными аналитическими методами. Она отвечала за работу 
с высокоэффективными жидкостными хроматографами, что стимулировало ее 
интерес конкретно к ВЭЖХ. После ухода из лаборатории MTL Ширли приступила 
к работе в криминалистической лаборатории Лотианской и пограничной поли-
ции в должности эксперта- аналитика отдела химии и лекарственных средств. 
После недолгого руководства группой химиков она ушла из полиции и начала 
работать в области судебной медицины и криминалистики.
В 1998 году приступила к работе в подрядной компании Quintiles Ltd (в отделе 
разработки фармацевтических методов). Руководила группой специалистов, 
ответственных за разработку и аттестацию методов анализа с помощью ВЭЖХ 
(анализов новых лекарственных препаратов). Через несколько лет Ширли 
заняла должность руководителя аналитической службы фирмы BioReliance Ltd. 
К ее служебным обязанностям относилось и руководство группой аналити-
ков, ответственных за разработку и аттестацию методов, за внедрение утверж-
денных методов анализа продукции биофармацевтической промышленности. 
В 2005 году Ширли перешла на работу в Университет Тиссайда на должность 
старшего преподавателя и руководителя курса судебно- медицинской и криминалистической 
экспертизы.
Мишель Карлин училась в Университете Хериот- Уотта на престижном 
факультете химии красителей; после краткого периода работы на красильном 
производстве (на границе с Шотландией) начала карьеру в роли специалиста 
по аналитической химии. Проработав в течение некоторого времени в подрядной 
исследовательской организации в Эдинбурге, Мишель продолжила обучение 
в Стартклайдском университете, где стала магистром судебной медицины. 
Диссертационную работу выполнила на технологическом факультете Института 
уголовного розыска национальной жандармерии (IRCGN) в Париже. Проводила 
исследования с помощью системы ЖХ–МС, использующей ионизацию электростатическим 
распылением.
После этого Мишель стала руководителем лаборатории, занимающейся проверкой 
злоупотребления наркотиками на рабочих местах в Северо- Восточной 
Англии. Затем получила должность преподавателя факультета судмедэкспер-
тизы в Университете Тиссайда, где проработала 3 года. В 2009 году перешла 
в Университет Нортумбрии, где заняла должность младшего преподавателя на 
факультете судебно- медицинской и криминалистической экспертизы. На этой 
работе занимается исследованиями в области аналитической токсикологии.

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Глава 1

Введение

Данное учебное пособие посвящено высокоэффективной жидкостной хрома-
тогафии (ВЭЖХ). Этот метод химического анализа возник в относительно давние 
времена. Хроматография —  способ, основанный на целом ряде видов разделения, 
таких как тонкослойная хроматография (TLC), высокоэффективная жидкостная 
хроматография (HPLC), газожидкостная хроматография (GLC), на сегодняшний 
день более правильно называемая газовой хроматографией (GC). Каждый из этих 
способов разделения широко используется в современной аналитической химии.
В судебно- медицинской и криминалистической экспертизе хроматография 
используется для анализа наркотиков, для токсикологических исследований, 
анализа остатков на месте пожаров, экологического анализа и анализа взрывча-
тых веществ (здесь упомянуты лишь несколько областей применения). Данное 
учебное пособие знакомит с каждым из этих методов хроматографических раз-
делений, главным образом, с высокоэффективной жидкостной хроматографией 
(HPLC). Но прежде необходимо пояснить, что представляет собой хроматография, 
и обсудить основные принципы хроматографического разделения.

История развития хроматографии

Метод хроматографии в его нынешнем состоянии существует давно, и поэтому 
трудно поверить, что первое сообщение о хроматографическом разделении и воз-
никновение самого слова «хроматография» датировано чуть больше 100 лет назад 
(см. п. 1 раздела «Примечания и пояснения, добавленные редактором»). Михаил 
Семенович Цвет (1872–1919) родился в маленьком городке в Италии, но рос 
в семье отца в Швейцарии. Повзрослев, Цвет поступил на ботанический факуль-
тет Женевского университета и к 1896 году завершил работу по написанию док-
торской диссертации, посвященной изучению структуры клеток растений, хло-
ропластов и движения протоплазмы.
В 1896 году Цвет переехал в Россию для воссоединения с отцом, но столкнулся 
со сложностью найти желаемую научную и педагогическую работу. Он вынужден 
был согласиться на получение временной должности сотрудника лаборатории 
и стал работать ради получения степени магистра, необходимой, чтобы претен-
довать на занятие научной должности в России (см. п. 2 раздела «Примечания 
и пояснения, добавленные редактором»). Во время проведения исследователь-
ских работ Цвет начал создавать основы для развития хроматографии как метода.
Проводимые Цветом работы предусматривали извлечение хлорофилла из расти-
тельного материала. В ходе такой деятельности Цвет выявил отличие полярных 
растворителей от неполярных при оценке эффективности выделения. Он пришел 
к выводу, что получаемый результат объясняется не только растворимостью хло-
рофилла в выбранном растворителе. Скорее всего при работах с растительными 

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru

Глава 1

клетками играло роль и разделение, обусловленное межмолекулярными взаимо-
действиями с хлорофиллом.
Придя к такому заключению, Цвет приступил к исследованиям более 100 орга-
нических и неорганических материалов, которые могли использоваться в качестве 
адсорбентов. Он сообщил о полученных результатах в 1903 году, но не опублико-
вал всех подробностей до завершения дальнейших исследований, итоги которых 
были изложены в 1906 году в двух основополагающих статьях в журнале Bulletin of 
the German Botanical Society. Тогда впервые был упомянут термин «хроматография».
К сожалению, проведенная Цветом работа не была признана его современ-
никами. Однако через 10 лет после его смерти важность созданного метода была 
осознана. В разных областях науки с помощью хроматографических разделений 
были решены многие прикладные задачи. Несмотря на то что достижения Цвета 
некоторыми учеными высмеивались, прочие задействовали метод хроматогра-
фии в выполняемых ими работах (например, этими разработками воспользова-
лись Лерой Шелдон- Палмер. Арчер Мартин и Ричард Синг).
Лерой Шелдон- Палмер (1887–1944) исследовал содержание каротиноидов 
в сливочном масле. Это был один из первых случаев применения метода, разра-
ботанного Цветом. В 1922 году Шелдон- Пармер опубликовал книгу, сообщавшую 
о работе с каротиноидами, которая привлекла внимание ученых других стран. 
Впоследствии это привело к переоценке метода в 1930-х годах.
Вскоре за Шелдон- Пармером наиболее известную работу опубликовали Арчер 
Мартин (1910–2002) и Ричард Синг (1914–1994) из Кембриджского универси-
тета. Эти ученые воспользовались силикагелем и водой в качестве неподвижной 
фазы в стеклянной колонке и хлороформом в качестве подвижной фазы для раз-
деления производных аминокислот. Это было началом эры распределительной 
хроматографии. Мартин и Синг получили в 1952 г. Нобелевскую премию за их 
вклад в область химических наук. Работы этих ученых привели к развитию других 
хроматографических методов, таких как бумажная хроматография (1944), тонко-
слойная хроматография (1956) и, в конце концов, высокоэффективная жидкост-
ная хроматография (1967–1969).

Основное оборудование

Те виды, которые приобрела жидкостная хроматография сегодня, в XXI веке, 
Цвет бы не узнал. Тем не менее основные принципы метода, описанные в его 
работе в начале XX века, остаются действующими; схема хроматографа не изме-
нилась (см. рис. 1.1). Исчезла необходимость набивки вручную стеклянных коло-
нок для выполнения разделений. Сегодня для реализации разделений мы поль-
зуемся очень тщательно сконструированными покупными набитыми колонками 
и специальными аналитическими приборами. В состав промышленно выпускае-
мых высокоэффективных жидкостных хроматографов входит целый ряд блоков, 
способствующих разделению, обнаружению веществ и просмотру получаемых 
хроматограмм. Каждый из таких блоков будет обсужден в последующих разделах 
этого пособия. Но следует ознакомиться с блок-схемой хроматографа до того, как 
перейти к обсуждению отдельных его компонентов.

©ЭБС «Химия», 2022 © ЦОП «Профессия», 2009–2022. Все права защищены. www.epcprof.ru