Книжная полка Сохранить
Размер шрифта:
А
А
А
|  Шрифт:
Arial
Times
|  Интервал:
Стандартный
Средний
Большой
|  Цвет сайта:
Ц
Ц
Ц
Ц
Ц
Доступ онлайн
700 ₽
В корзину
Руководство посвящено лабораторному этапу программ вспомогательных репродуктивных технологий. В нем обобщен многолетний опыт успешной работы эмбриологов, биологов и молекулярных генетиков Международного центра репродуктивной медицины (МЦРМ). Подробно и доступно описаны применяемые технологии, методы и методики, а также отражены тенденции и взгляды, получившие признание в современной клинической эмбриологии. Руководство предназначено для специалистов, работающих в области репродуктивной медицины, а также для тех, кто хочет проявить себя в этой области.
Руководство по клинической эмбриологии : руководство для врачей / В.С. Корсак, А.В. Балахонов, Н.К. Бичевая [и др.] ; под ред. В.С. Корсака. — 2-е изд. — Москва : СИМК, 2019. - 224 с. - ISBN 978-5-91894-076-1. - Текст : электронный. - URL: https://znanium.com/catalog/product/1052831 (дата обращения: 29.03.2024). – Режим доступа: по подписке.
Фрагмент текстового слоя документа размещен для индексирующих роботов. Для полноценной работы с документом, пожалуйста, перейдите в ридер.
СПЕЦИАЛЬНОЕ ИЗДАТЕЛЬСТВО МЕДИЦИНСКИХ КНИГ

Москва
2019

И К
МС

РУКОВОДСТВО 
ПО КЛИНИЧЕСКОЙ 
ЭМБРИОЛОГИИ

Сделано в МЦРМ

2-е издание

Под редакцией Корсака В.С.

УДК 611.013(035.3)
ББК 57.161.10я81 Р85
 
Р85

Авторы
Корсак В.С.; Балахонов А.В.; Бичевая Н.К.; Кузнецова Р.А.; Леонтьева О.А.; 
Логинова Ю.А.; Решетников И.В.; Сайфитдинова А.Ф.; Трофимова И.Л.

Руководство по клинической эмбриологии / [Корсак В.С., Балахонов А.В., Бичевая Н.К. и др.] ; под ред. Корсака В.С. — 2-е изд. — М. : 
CИМК, 2019. — 224 c. — ISBN 978-5-91894-076-1
I. Корсак, Владислав Станиславович. 
II. Балахонов, Алексей Викторович. 
III. Бичевая, Наталья Константиновна.

Агентство CIP РГБ

Руководство посвящено лабораторному этапу программ вспомогательных 
репродуктивных технологий. В нем обобщен многолетний опыт успешной 
работы эмбриологов, биологов и молекулярных генетиков Международного 
центра репродуктивной медицины (МЦРМ). Подробно и доступно описаны 
применяемые технологии, методы и методики, а также отражены тенденции 
и взгляды, получившие признание в современной клинической эмбриологии. 
Руководство предназначено для специалистов, работающих в области репродуктивной медицины, а также для тех, кто хочет проявить себя в этой области. 

УДК 611.013(035.3)
ББК 57.161.10я81 Р85

©  Коллектив авторов, 2019
©  Оформление ООО «МК», 2019

Все права защищены. Никакая часть данной 
книги не может быть воспроизведена в какой-либо форме без письменного разрешения владельцев авторских прав.

Издательство не несет ответственности за содержание авторского материала.

Р85

АВТОРСКИЙ КОЛЛЕКТИВ

Корсак Владислав Станиславович —
врач — акушер-гинеколог высшей категории, доктор медицинских наук, 
профессор. Генеральный директор Международного Центра 
Репродуктивной Медицины (МЦРМ). Президент Российской 
Ассоциации Репродукции Человека (РАРЧ)

Балахонов Алексей Викторович — 
профессор кафедры Физиологии Медицинского факультета СПбГУ, кандидат 
биологических наук, доктор педагогических наук, Почетный работник высшего 
профессионального образования Российской Федерации

Слева направо:
Бичевая Наталья Константиновна — заведующая лабораторий эмбриологии МЦРМ, кандидат биологических наук
Трофимова Ирина Леонидовна — лабораторный генетик МЦРМ, кандидат биологических наук
Сайфитдинова Алсу Фаритовна — лабораторный генетик МЦРМ, кандидат биологических наук
Леонтьева Ольга Анатольевна — эмбриолог МЦРМ
Решетников Игорь Владимирович — эмбриолог МЦРМ, кандидат биологических наук
Кузнецова Рена Алескеровна — эмбриолог МЦРМ

ОГЛАВЛЕНИЕ

Предисловие ко 2-му изданию (2018) .............................................................................................. 10
Предисловие к 1-му изданию (2011) ................................................................................................ 11
Письмо от Луизы Браун ................................................................................................................. 12
Введение ......................................................................................................................................... 14
О Международном центре репродуктивной медицины ................................................. 14
Достижения и важнейших даты МЦРМ .......................................................................... 14

Часть I. 
Исторические аспекты и фундаментальные основы биологии развития ................. 16

1.1.  
Эмбриология и биология развития ................................................................................... 16
1.2. 
От Аристотеля до ВРТ ....................................................................................................... 17
Приложения 
 ........................................................................................................................... 26
Приложение 1 
 Представление к присуждению премии Альберта Ласкера 
за клинические медицинские исследования 2001 года 
за разработку экстракорпорального оплодотворения — передовой 
технологии, совершившей революцию в лечении бесплодия у человека 
(рекомендательный отзыв Эвелин Страус) ..................................................... 26
Приложение 2 
 Речь председателя жюри Премии Ласкера Джозефа Л. Голдстайна 
на церемонии вручения премии Роберту Эдвардсу в номинации 
«Клиническая деятельность» (2001 год) .......................................................... 30
1.3. 
Основные представления о развитии ............................................................................... 34
1.4. 
Гаметогенез ........................................................................................................................ 38
1.5. 
Сперматогенез ................................................................................................................... 39
1.6. 
Оогенез ............................................................................................................................... 41
1.7. 
Менструальный цикл ........................................................................................................ 45
1.8. 
Оплодотворение ................................................................................................................ 51
1.9. 
Образование зиготы .......................................................................................................... 54
1.10. 
Дробление. Образование бластоцисты ............................................................................. 56
1.11. 
Близнецы ........................................................................................................................... 63
1.12. 
Имплантация ..................................................................................................................... 67

Часть II. Вспомогательные репродуктивные технологии ......................................................... 71

2.1. 
Термины  ............................................................................................................................ 73
2.2.  
МКБ-10: Названия, относящиеся к ВРТ .......................................................................... 82
2.3.  
Аббревиатуры, используемые в клинической эмбриологии ............................................ 84
2.4.  
Аббревиатуры, термины, профессиональный жаргон, 
 
которыми пользуются эмбриологи МЦРМ 
 
(частично неизвестные врачам и не вошедшие в «Глоссарий 2017»)............................... 86

Часть III. Лаборатория эмбриологии (организация) .................................................................. 90

3.1. 
Расположение лаборатории .............................................................................................. 90
3.2.  
Контроль качества воздуха ................................................................................................ 92

Оглавление

3.3.  
Санитарно-эпидемиологический режим ......................................................................... 93
3.4.  
Штатное расписание ......................................................................................................... 94
3.4.1. 
Руководитель лаборатории .............................................................................. 95
3.4.2. 
Персонал лаборатории ..................................................................................... 95
3.5.  
Лабораторное оборудование ............................................................................................. 96
3.5.1.   
Основные требования к оборудованию........................................................... 96
3.5.2.  
Ламинары (Workstation).................................................................................... 97
3.5.3.  
Инкубаторы ...................................................................................................... 97
3.5.4.  
Микроманипуляторы ....................................................................................... 98
3.6.  
Криохранилище ................................................................................................................. 98
3.7.  
Расходные материалы ........................................................................................................ 98
3.8.  
Чрезвычайные ситуации ................................................................................................... 99

Часть IV. Лабораторный этап .................................................................................................... 100

4.1.  
Получение сперматозоидов в программах ВРТ.............................................................. 100
4.1.1.  
Спермограмма ................................................................................................ 100
4.1.2.  
Получение сперматозоидов из эякулята ....................................................... 102
4.1.3.  
Подготовка сперматозоидов в программах ВРТ ........................................... 105
4.1.4.  
Альтернативные методы обработки спермы ................................................. 108
4.1.5.  
Получение сперматозоидов у пациентов с азооспермией
(лабораторный этап) ...................................................................................... 114
4.1.6. Обработка спермы ВИЧ-инфицированных пациентов........................................ 119
4.2.  
Пункция фолликулов ...................................................................................................... 121
4.2.1.  
Подготовительные мероприятия накануне пункции фолликулов 
(– 1 день)......................................................................................................... 121
4.2.2.  
Подготовительные мероприятия в день пункции фолликулов 
(день 0) ............................................................................................................ 122
4.2.3.  
Аспирация ооцитов ........................................................................................ 123
4.2.4.  
Оценка качества полученных ооцитов .......................................................... 124
4.3.  
Оплодотворение ооцитов in vitro ..................................................................................... 125
4.3.1.  
Классическое ЭКО ......................................................................................... 125
4.3.2.  
Инъекция сперматозоида в цитоплазму ооцита (ИКСИ) ............................ 126
4.3.3.  
ИМСИ (IMSI) ................................................................................................ 136
4.3.4.  
ПИКСИ (PICSI) ............................................................................................. 137
4.4.  
Культивирование преимплантационных эмбрионов человека ..................................... 139
4.4.1.  
Оценка оплодотворения и развития эмбрионов ........................................... 140
4.4.2.  
Перенос эмбрионов ........................................................................................ 146
4.5. 
Криоконсервация спермы ............................................................................................... 150
4.5.1.  
Оборудование ................................................................................................. 151
4.5.2.  
Расходные материалы .................................................................................... 151
4.5.3.  
Медленный метод замораживания нативной спермы (в виалах) ................. 152
4.5.4.   
Размораживание спермы после «медленной» заморозки ............................. 152
4.5.5.  
Использование размороженной спермы  ...................................................... 152
4.6.  
Криоконсервация сперматозоидов, полученных оперативным путем 
 
(ТЕСА, ПЕСА и др.) ........................................................................................................ 152
4.6.1.  
Замораживание и размораживание биоптата/аспирата  ............................... 153
4.6.2.  
Использование размороженного материала после ПЕСА и ТЕСА .............. 153
4.7.  
Криоконсервация ооцитов и эмбрионов ........................................................................ 153
4.7.1.   
Медленная заморозка ................................................................................... 154
4.7.2.  
Витрификация (ультрабыстрая заморозка) .................................................. 155
4.7.3.  
Крионосители для витрификации ................................................................ 156
4.7.4.  
Витрификация ооцитов/эмбрионов в МЦРМ ............................................. 156

Оглавление 
9

4.7.5.  
Практический опыт МЦРМ криоконсервации ооцитов ............................. 158
4.7.6.  
Практический опыт витрификации эмбрионов .......................................... 160

Часть V. 
Преимплантационное генетическое тестирование .................................................. 161

5.1.  
История и развитие методов ........................................................................................... 161
5.2.  
Показания к проведению ПГТ ........................................................................................ 164
5.3.  
1-й этап: биопсия клеточного материала........................................................................ 169
5.3.1.  
Подготовка к биопсии .................................................................................... 169
5.3.2. 
Биопсия полярных тел для ПГТ методом FISH ............................................ 171
5.3.3.  
Биопсия бластомеров для ПГТ методом FISH ............................................. 172
5.3.4.  
Биопсия для ПГТ методом ПЦР, array-CGH, NGS ...................................... 174
5.3.5.  
Биопсия трофэктодермы................................................................................ 176
5.4.  
2-й этап: Подготовка биопсированных клеток .............................................................. 178
5.4.1.  
Фиксация полярных тел и бластомеров для FISH ........................................ 178
5.4.2.   
Подготовка клеток при ПГТ методом ПЦР .................................................. 180
5.4.3.  
Подготовка клеток (бластомеры, трофэктодерма) 
 
 
при ПГТ методом a-CGH и NGS ................................................................... 181
5.5.  
Молекулярно-генетическое или молекулярно-цитогенетическое исследование 
 
единичных клеток ............................................................................................................ 182
5.6.  
Влияние эмбрионального мозаицизма на интерпретацию результатов ........................ 186

Список литературы ..................................................................................................................... 191

Приложения ................................................................................................................................. 199
Приложение 3 
 Информированное добровольное согласие на криоконсервацию 
и хранение эмбрионов .................................................................................... 199
Приложение 4 
 Отказ от переноса анэуплоидных эмбрионов/криоконсервации 
анэуплоидных эмбрионов .............................................................................. 203
Приложение 5 
 Информированное добровольное согласие на проведение лечения 
бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения 
с использованием криоконсервированных ооцитов (яйцеклеток) донора 204
Приложение 6 
 Информированное добровольное согласие на проведение лечения 
бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) 
путем размораживания и переноса донорских эмбрионов .......................... 207
Приложение 7 
 Информированное добровольное согласие на проведение лечения 
бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения 
с использованием донорской спермы  .......................................................... 209
Приложение 8 
 Информированное добровольное согласие на проведение лечения 
бесплодия методом искусственной инсеминации с использованием 
криоконсервированной спермы супруга ....................................................... 212
Приложение 9 
 Заявление на прекращение хранения биоматериала .................................... 214
Приложение 10 
 Информированное добровольное согласие пациентов на перенос 
эмбрионов с выявленными отклонениями в наборе хромосом ................... 215
Приложение 11 
 Информированное добровольное согласие на хранение эякулята 
в условиях карантина  ..................................................................................... 216
Приложение 12 
 Информированное добровольное согласие донора спермы ........................ 218
Приложение 13 
 Информированное добровольное согласие на размораживание 
и перенос  эмбрионов ..................................................................................... 220

«Руководство по клинической эмбриологии. Сделано в МЦРМ» вышло 7 лет 
назад. Все это время лабораторное оснащение, организация работы, применяемые 
методы и методики совершенствовались, поэтому мы решили не допечатывать 
тираж, как делали уже несколько раз, а выпустить новое переработанное и дополненное издание, в котором хотели рассказать о произошедших изменениях, современных тенденциях и направлениях, сохранив информацию о нашем опыте, 
позволившем МЦРМ раньше других достичь высоких результатов и 25 лет находиться среди лидирующих центров ВРТ не только в нашей стране, но и в мире.
Повторим из прежде написанного: «Мы ясно понимаем, что при строгом следовании рецепту из поваренной книги можно сварить борщ, но вкус его будет 
разным у каждого из поваров. Результат, конечно, определяется не только качеством исходных продуктов, но талантом, опытом, профессионализмом, наконец, 
любовью к делу специалиста».
Особенностью ВРТ является то, что результат, как ни в какой другой области, 
напрямую зависит от согласованной взаимоопределяющей работы тандема, состоящего из врача и эмбриолога. Следует отметить, что эмбриологи — это специалисты, которые должны обладать не только знаниями, но главное — уникальными навыками: оперировать под микроскопом на живых половых клетках и 
эмбрионах, обеспечивая их способность к дальнейшему «превращению» в здорового человека. Иными словами, клинический эмбриолог является специалистом 
ни в чем не уступающим, а даже превосходящим, известного всем Левшу.
Руководство не может заменить учебу у мастера, но мы надеемся, что с его помощью наши коллеги смогут сократить «опыты быстротекущей жизни», избежать 
многих ошибок, тем самым оправдав чаяния доверившихся им пациентов.

В.С. Корсак  
16. 08. 2018 г.

ПРЕДИСЛОВИЕ КО 2-МУ ИЗДАНИЮ (2018)

С момента публикации нашей первой книги «Сделано в МЦРМ. Руководство 
по вспомогательным репродуктивным технологиям для врачей и эмбриологов» 
прошло 3 года. Тысячные тиражи быстро расходились, и это при очень небольшом числе специалистов, работающих в центрах ВРТ в нашей стране. Из откликов и пожеланий, поступивших к нам и в издательство, стало понятно, что 
потребность в книге для специалистов, которые собираются или начинают работать в области клинической эмбриологии, есть. Мы пригласили к соавторству 
профессора Медицинского факультета СПбГУ, кандидата биологических наук, 
Почетного работника высшего профессионального образования Российской Федерации А.В. Балахонова. Предложенный им материал по истории, фундаментальным основам эмбриологии и биологии развития полностью совпал с нашим 
подходом к изложению: писать просто о сложном. Наш коллега А.А. Бараш нашел 2 важных в историческом отношении документа: пресс-релиз о Роберте Эдвардсе, выпущенный в связи с его награждением премией Альберта Ласкера* за 
клинические медицинские исследования 2001 г. (Albert Lasker Award for Clinical 
Medical Research, 2001), и речь Joseph L. Goldstein во время этой церемонии, которая показалась нам более интересной, чем представление на Нобелевскую премию 2010 г. После того как мы соединили и отредактировали все материалы, получилось это Руководство.

В.С. Корсак  
29. 06. 2011 г.

* Премия Ласкера — одна из самых авторитетных научных премий в мире. С 1945 г. 
Программой премий отмечается вклад ученых, врачей и государственных должностных 
лиц, совершивших крупные достижения в понимании, диагностике, лечении, исцелении 
и предотвращении болезней человека. Премии Ласкера часто являются предвестниками 
будущего признания Нобелевским комитетом, поэтому их неофициально называют «Американскими нобелевками». Восемьдесят ласкеровских лауреатов получили Нобелевские 
премии, в том числе 28 в последние два десятилетия.

ПРЕДИСЛОВИЕ К 1-МУ ИЗДАНИЮ (2011)

Так случилось, что работу над этим изданием мы закончили накануне 25 июля 
2018 г. — 40 летнего Юбилея Луизы Браун. В начале 2018 г. Луиза прислала положительный ответ на просьбу РАРЧ о разрешении отмечать в день ее рождения 
Всемирный день ВРТ. Вот это письмо:

Message from Louise Brown 

To: Professor V.S. Korsak, 
 RAHR President (Russian Association 
of Human Reproduction). 
Dear Professor Korsak. 

My best wishes to you and all who 
work in the field of Human Reproduction 
in Russia, you are all doing a wonderful job 
to help people. 
In the last few years I have met people 
working in the fields of IVF and other 
Assisted Reproductive Technology (ART) in 
many countries. My mother, Lesley Brown, 
would be amazed to see the methods that are 
used today and how sophisticated ART has 
become in 40 years. It means so many more 
infertile couples can now receive help and 
enjoy the joy of parenthood. 
It was my mother, my father John Brown, Robert Edwards, Patrick Steptoe and Jean 
Purdy who deserve all the praise and credit for their pioneering attitude. I did very little 
except arrive happily and healthily 40 years ago! 
World ART Day sounds like a fantastic idea. Through the internet I notice every year 
those people working in ART celebrating my birthday with cakes, dressing in green scrubs 
like those used by the pioneers and having open days at clinics. 
If people believe that July 25, my birthday, is the most appropriate date to mark and 
celebrate the wonderful work of all in the fields of ART I am happy to support the idea. 
But the credit must always go to my parents, the pioneering team, and all those who 
work in ART worldwide. There are millions of people in the world grateful for the work 
you all do. 

Best wishes, 
Louise Brown.

ПИСЬМО ОТ ЛУИЗЫ БРАУН 

Перевод:

Письмо от Луизы Браун

Профессору В.С. Корсаку,
Президенту РАРЧ (Российской Ассоциации Репродукции Человека).
Дорогой Профессор Корсак.

Мои наилучшие пожелания Вам и всем, кто работает в сфере репродукции 
человека в России, вы делаете прекрасное дело, помогая людям. 
В последние годы я встречалась с людьми, работающими в области ЭКО и других вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) во многих странах. Моя 
мать, Лесли Браун, была бы поражена, увидев, какие технологии используются 
сегодня и насколько усложнились ВРТ за 40 лет. Это означает, что еще намного 
больше бесплодных пар могут сейчас получить медицинскую помощь и испытать 
счастье быть родителями. 
Моя мать, мой отец Джон Браун, Роберт Эдвардс, Патрик Стептоу и Джин 
Пурди — именно они были первопроходцами и заслуживают все почести и уважение. Моя заслуга совсем невелика, я просто родилась здоровой и счастливой 
40 лет назад!
Всемирный день ВРТ — это превосходная идея. Каждый год я вижу в Интернете, как профессионалы, работающие в сфере ВРТ, отмечают мой день рождения 
с тортами, одетые в зеленую хирургическую форму, как и пионеры в этой области; 
как клиники проводят дни открытых дверей. 
Если люди считают, что 25 июля, мой день рождения, это самая подходящая 
дата, чтобы отмечать результаты прекрасной работы всех, кто трудится в области 
ВРТ, я рада поддержать эту идею. 
Однако все лавры всегда будут принадлежать моим родителям, команде первопроходцев и всем тем, кто работает в сфере ВРТ во всем мире. Миллионы людей в мире благодарны вам за работу, которую вы делаете. 

С наилучшими пожеланиями,
Луиза Браун 

Доступ онлайн
700 ₽
В корзину