БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СИНТЕТИЧЕСКИХ АНАЛОГОВ ПРИРОДНОГО КАТЕЛИЦИДИНА
Бесплатно
Основная коллекция
Издательство:
НИИ ноpмальной физиологии им. П.К. Анохина
Год издания: 2015
Кол-во страниц: 4
Дополнительно
ББК:
УДК:
ГРНТИ:
Скопировать запись
Фрагмент текстового слоя документа размещен для индексирующих роботов.
Для полноценной работы с документом, пожалуйста, перейдите в
ридер.
БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СИНТЕТИЧЕСКИХ АНАЛОГОВ ПРИРОДНОГО КАТЕЛИЦИДИНА А.Ю. Артамонов *, О.В. Шамова*,**, Д.С. Орлов*,**, Н.И. Колодкин ***, М.П. Смирнова*** *- Отдел общей патологии и патофизиологии (зав. – д.б.н., О.В. Шамова) ФГБНУ «ИЭМ»; **- Кафедра биохимии (зав. – д.б.н., В.Е.Стефанов) СПбГУ; *** - Лаборатория химии пептидов (зав. – д.б.н., А.А. Колобов) ФГУП «ГНИИ ОЧБ» ФМБА России auartamonov@bk.ru, Артамонов А. Ю. Ключевые слова: врожденный иммунитет, антимикробные пептиды, кателицидин Введение. Проблема преодоления устойчивости патогенных микроорганизмов к широко используемым типам противобактериальных лекарственных средств [2] может быть решена путем применения антимикробных пептидов (АМП) системы врожденного иммунитета, которые рассматриваются как перспективная основа для разработки препаратов с антибактериальными, фунгицидными, противоопухолевыми и иммунокорригирующими свойствами. Создание различных структурных модификаций природных АМП и анализ их биологической активности позволяет выявить направления оптимизации функциональных свойств этих молекул для практического применения. Цель исследования: изучение антимикробной, гемолитической, цитотоксической активности, влияния на проницаемость наружной и цитоплазматической мембран E.coli штамм ML-35p природного пептида индолицидина (Ind) [3] и его синтетических аналогов – пептидов АП1, АП2, АП3, АП4, АП5, АП6. Методика исследования. Проведен анализ биологической активности следующих пептидов, полученных методом твердофазного синтеза: Ind (ILPWKWPWWPWRR-NH2), АП1 (ILPWAWPWWPWRR-NH2), АП2 (ILPWKKPWKPWRR-NH2), АП3 (IKPWKWPWKPWRR-NH2), АП4 (IKPWKWPWKPWAR-NH2), АП5 (KKPWKWPKKPWRRNH2), АП6 (IKKWKKPWKKWRR-NH2). В работе использованы следующие бактерии: Escherichia coli, штамм ML-35p; Listeria monocytogenes, штамм EGD; Staphylococcus aureus, штамм 710а, а также культура клеток К562 миелоидной лейкемии. Эритроциты человека получены от здоровых доноров 20-30 лет. Количественная оценка антимикробной активности изучаемых пептидов, выраженная в значении минимальной ингибирующей рост микроорганизмов концентрации (МИК), определена с помощью маркера метаболической активности – ресазурина. Гемолитический эффект антимикробных пептидов в отношении эритроцитов человека основан на измерении оптической плотности проб, содержащих гемоглобин, вышедший из лизированных эритроцитов, при длине волны 540 нм. Цитотоксическое действие пептидов исследовали с помощью МТТ-теста. Изменение проницаемости мембран бактерии E. coli штамм ML35p при воздействии использованных в работе пептидов исследовали применяя хромогенные маркеры ONPG и нитроцефин, являющиеся субстратами для ферментов β-галактозидазы (в цитоплазме) и β-лактамазы (в периплазматическом пространстве), соответственно [1]. Результаты исследования. Установлены следующие значения МИК для пептидов Ind, АП1, АП2, АП3, АП4, АП5 и АП6: 1,25; 5,00; 0,31; 0,63;