Диагностика цестод - возбудителей болезней сельскохозяйственных животных

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ 
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ 
ПРИКЛАДНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ

Кафедра "Инфекционные и паразитарные болезни 
сельскохозяйственных животных"

ПАРАЗИТОЛОГИЯ

ДИАГНОСТИКА ЦЕСТОД -  ВОЗБУДИТЕЛЕЙ 
БОЛЕЗНЕЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ 
ЖИВОТНЫХ

Методические указания 
к выполнению лабораторных работ 

для студентов специальностей 110501,110502

МОСКВА 2004

Составили: Н.Е. Косминков, д.в.н., проф. 
Б.К. Лайпанов, д.в.н.

Методические указания предназначены для выполнения лабораторных работ студентами ветеринарно-санитарного факультета.
Методические указания могут быть использованы при выполнении 
курсовых, дипломных, научных работ и при прохождении студентами 
производственной практики в животноводческих хозяйствах и мясоперерабатывающих предприятиях.

Утверждены Советом по издательской деятельности МГУПБ.

© МГУПБ, 2004

В В Е Д Е Н И Е

Цель настоящих методических указаний -  научить студентов ветеринарно-санитарного факультета использовать в своей работе прижизненные и посмертные методы диагностики возбудителей цестодозов у животных.
Цестоды, или ленточные черви -  биогельминты, в основном паразитирующие в половозрелой стадии своего развития в кишечнике позвоночных животных и человека. Личиночные же стадии цепней -  цистицеркои- 
ды, цистицерки, ценурусы, эхинококки -  развиваются в органах и тканях 
промежуточных хозяев (травоядные, всеядные, членистоногие и др.), а личинки лентецов -  процеркоиды, плероцеркоиды -  развиваются последовательно в двух хозяевах -  промежуточном и дополнительном (членистоногие, рыбы, рептилии).
Тело цестод, в большинстве случаев, сплющено в дорзовентральном 
направлении, снаружи покрыто кутикулой. Цестоды имеют сколекс различного строения, вооруженный или присосками или присосками и 
крючьями. За сколексом располагается короткая и самая узкая часть цестоды, именуемая шейкой, которая является зоной роста и отпочковывает 
членики паразита, тем самым формирует стробилу, которая может достигать нескольких метров (тении). В редких случаях число члеников у цестод 
может быть не более 2-3 и даже всего один. В каждом половозрелом членике развивается один или два комплекта мужских и женских половых органов, т.е. почти все цестоды являются гермафродитами, в половозрелой 
стадии у них отсутствует кишечник.
Дорзальной поверхностью у цестод считается сторона, под которой 
располагаются семенники, вентральной -  та, где лежит яичник, а также у 
части цестод открываются половые отверстия (Pseudophyllidea).
По длине и ширине цестоды варьируют от нескольких миллиметров 
до 12 и более метров при ширине члеников от долей миллиметра до 40 мм.
Цестоды относят к типу плоских червей (Plathelminthes). Тип плоских червей объединяет восемь различных классов, из которых ветеринарное (медицинское) значение имеют виды, относящиеся только к двум классам: Cestoda и Trematoda.
Наибольшее значение для ветеринарии представляют цестоды, относящиеся к двум отрядам: Cyclophyllidea (цепни) и Pseudophyllidea (ленте- 
цы).
К классу цестода отнесено более трех тысяч различных видов ленточных червей, паразитирующих у различных видов животных и человека.

з

МОРФОЛОГИЯ ЦЕСТОД

Сколекс располагается на переднем конце стробилы и выполняет 
функцию прикрепления к тканям хозяина. У цепней сколекс представляет 
собой упругое шаровидной или кубической формы образование с четырьмя мышечными присосками чашевидной формы, расположенными в 
виде квадрата. Нередко в центре между присосками располагается более 
или менее развитое холмиковидное возвышение, называемое хоботком 
сколекса. На хоботке в один или два ряда по окружности располагаются 
хитиновые крючья, служащие так же, как и присоски для прочного прикрепления к слизистой оболочке кишечника хозяина.
У других видов цестод (лентецы) сколекс вытянутой формы с двумя 
продольными углублениями (ямками) -  ботриями, располагающимися на 
дорзальной и вентральной поверхностях. На сколексе может быть и одна, и 
две, и четыре ботрий. Если ботрий на сколексе четыре, они располагаются 
попарно на дорзальной и вентральной поверхностях сколекса. Строение и 
расположение ботрий на сколексах различных видов лентецов весьма разнообразно. Они могут располагаться на достаточно длинных стебельках 
или быть разделены на сегменты поперечными или продольными перегородками, а также могут иметь еще добавочные присоски и др. (рис. 1).
Среди цестод имеются (цепни) виды, у которых на сколексе отсутствуют какие-либо органы прикрепления (присоски, ботрии, крючья). Такие 
цестоды своим мощным сколексом (булавовидный) внедряются глубоко в 
толщу кишечной стенки своего хозяина и, таким образом, прочно удерживаются в нем (рис. 2).
Фиксаторные элементы цестод -  ботрии и присоски -  являются мышечными образованиями.
Ботрия — это мышечный орган, ограниченный двумя губами. Считается, что такая форма фиксации в организме хозяина является наиболее 
примитивной.
Присоски -  полукруглые мышечные образования, располагающиеся 
крест-накрест на сколексе в количестве четырех, являются характерным 
признаком цепней. У многих цестод на присосках могут быть расположены крючья: как по краям, так и в их полости (рис. 3).
Крючья. Крючья -  это кутикулярные, хитинизированные образования достаточно сложной конфигурации, встречающиеся как у лентецов, 
так и у цепней. У лентецов крючья нередко очень крупные, располагаются 
по краям ботрии. Для цепней характерным является расположение крючьев на хоботке сколекса. Хитиновые крючья для каждого вида цестод строго 
определенной формы, величины и количества. Количество крючьев исчисляется тысячами, располагаются они строго в определенном порядке, образуя корону из одного или двух рядов. Различают крючья и по величине: 
большие и малые. В теле крючка различают -  лезвие, рукоятку и корневой 
отросток (рис.4).

Хоботок у цепней это мышечное образование, расположенное на 
вершине сколекса. Под хоботком располагается полость, именуемая хоботковым влагалищем, из которого хоботок выдвигается наружу, или втягивается вновь вглубь сколекса.
Шейка цестод -  это самая узкая часть стробилы, расположенная сразу же за сколексом, по длине не превышает нескольких миллиметров. От 
заднего края шейки постоянно отпочковываются членики, которые и формируют в дальнейшем стробилу цестоды.
Стробила. Внутреннее строение члеников цестод по мере их удаления от шейки изменяется. В бесполых члениках зародышевая ткань еще не 
дифференцирована. По мере удаления члеников от шейки в них вначале 
формируются мужские органы: бурса цирруса, циррус, семенники и даже 
элементы вагины. Такие членики называются мужскими. В дальнейшем в 
мужских члениках начинают развиваться женские половые органы: яичник, желточники, семяприемник, тельце Мелиса и, в последнюю очередь, 
матка. Членики с полностью развитыми мужскими и женскими органами 
именуются гермафродитами или половозрелыми (рис. 5).
Матка в гермафродитных члениках постепенно заполняется яйцами, 
увеличивается в размерах, заполняя собой пространство внутри членика, 
постепенно угнетая функции мужских и женских желез, приводя, в конечном итоге, к их полной атрофии. Членики, в которых атрофированы семенники, яичник и желточники разросшейся маткой, переполненной яйцами, называются зрелыми, или женскими (рис. 6).
Зрелые членики самопроизвольно поодиночке или группами отрываются от стробилы и выбрасываются с фекалиями дефинитивного хозяина 
во внешнюю среду.
Описанный процесс формирования половой системы в члениках не 
является абсолютным для всех цестод. Имеются виды, у которых очередность развития половых желез несколько иная, чем описанная.
По своей форме членики цестод бывают прямоугольными, трапециевидными, овальными и т.д. В процессе своего развития членики изменяют 
свою форму: чем дальше расположен членик от шейки, тем он становится 
длиннее. В конце стробилы членики становятся длинными и узкими, нередко - овальными, или мешковидными. Самые крупные членики находятся в хвостовой части стробилы (рис. 7).
Тело цестод (сколекс, шейка и членики) представляют собой кожномышечный мешок (тегумент), состоящий из наружного слоя, или кутикулы; среднего -  очень тонкого, называемого базальной мембраной, и внутреннего -  субкутикулярного (рис. 8).
Кутикула имеет волокнистую структуру и пронизана множеством 
пор. В ее толще располагаются вакуоли и митохондрии. Более толстая кутикула наблюдается в половозрелых и зрелых члениках.
На наружной поверхности кутикулы располагаются тончайшие вы

росты -  митохондрии, а у некоторых лентецов -  и еще довольно крупные 
ворсинки.
Базальная мембрана тегумента является связующей тканью между 
кутикулой и субкутикулой.
Субкутикула состоит из субкутикулярных клеток и известковых телец. Субкутикулярные клетки подразделяются на «темные», пронизывающие своими отростками базальную мембрану, соединяясь тем самым с кутикулой. Среди субкутикулярных клеток располагаются два слоя мышц -  
кольцевые и продольные. Известковые тельца имеют слоистое строение, 
по форме -  овальные или округлые.
Полость, образованная кожно-мышечным мешком, заполнена губчатой тканью -  паренхимой. Паренхима состоит из соединительнотканных 
клеток, со множеством отростков. Вся паренхима пронизана гомогенной 
жидкой массой -  лимфой. Среди паренхимы рассеяны нервные клетки, известковые тельца и пламеневидные клетки; располагаются половые органы, нервная и экскреторная системы.
Нервная система у цестод представлена кольцевидным нервным 
ганглием, находящимся в сколексе. От него вперед отходят короткие нервные веточки к присоскам, а назад -  основные нервные стволы, располагающиеся в боковых частях шейки и члеников. Между собой продольные 
нервные стволы соединяются кольцевыми комиссурами у заднего края каждого членика (рис. 9).
Экскреторная система у цестод состоит из четырех каналов -  двух 
дорзальных и двух вентральных, располагающихся в боковых частях члеников.
В конце стробилы все четыре экскреторных канала соединяются в 
общий экскреторный сосуд, открывающийся одним экскреторным отверстием на середине заднего края первичного членика. После его отторжения 
от стробилы все четыре канала открываются наружу самостоятельными 
отверстиями.
Половая система у цестод гермафродитная. В каждом отдельно взятом членике развиваются мужские и женские органы. Набор половых органов в члениках у одних цестод одинарный, у других двойной. Мужские и 
женские половые отверстия открываются в большинстве случаев с боку 
члеников, реже -  на середине вентральной поверхности членика. У цестод 
с одинарным набором половых органов половые отверстия располагаются 
во всех члениках, либо правильно или неправильно чередуясь. Отверстия 
цирруса и вагины открываются в чашевидное образование, называемое половой клоакой.
Мужские половые органы состоят из семенников, количество екото- 
рых от одного до нескольких сотен в одном членике, и отходящих от них 
семявыносящих канальцев, сливающихся в один семяпровод, заканчивающийся семяизвергательным каналом, конец которого заканчивается цирру

сом, помещающемся в половой бурсе. Перед входом в бурсу семяизверга- 
тельный канал у части цестод образует расширение, именуемое наружным 
семенным пузырьком. У других цестод внутри бурсы перед циррусом 
сформировывается еще второй семенной пузырек, называемый внутренним.
Половая бурса -  это мышечный орган, состоящий из продольных и 
круговых мышечных волокон, разнообразных по форме и величине. Они 
могут быть небольшими, округлой или грушевидной формы, располагаясь 
в границах бокового края членика и экскреторного канала. В других случаях половая бурса занимает всю ширину членика, или даже изгибается или 
спиралевидно скручивается (рис. 10).
Циррус у цестод может быть различной величины, гладким или 
снабженным мелкими нежными щетинками, или длинными волосовидными образованиями, либо крупными крючками и т.д.
Женская половая система, более сложная, чем мужская, представлена яичником, желточником, яйцеводом, семяприемником, тельцем Мелиса, 
оотипом, вагиной и маткой (рис. 11).
Яичник в большинстве случаев двулопастной, располагается чаще 
всего у заднего края членика, на ее вентральной стороне. В случаях двойного полового аппарата яичники отодвигаются к боковым сторонам членика. Форма яичника чаще всего лопастная, встречается также сетчатое или 
лучистое строение. От яичника отходит яйцевод, в начале которого имеется мышечный орган, засасывающий яйцеклетку, и называемый -  овикап- 
том. По яйцеводу яйцеклетка продвигается к оотипу. В яйцевод впадает 
проток из семяприемника, являющийся расширением вагины, через который поступает сперма. В яйцевод также впадает желточный проток и проток тельца Мелиса.
Слияние яйцеклетки со сперматозоидами происходит в отрезке яйцевода сразу же после овикапта, затем в яйцевод впадает проток из желточного резервуара. После впадения желточного протока, расширенная 
часть яйцевода (оотип) окружена компактной железой, называемой тельцем Мелиса.
Вагина представляет собой мышечную трубку, берущую начало в 
половой клоаке и заканчивающуюся около оотипа расширением -  семяприемником. Входное отверстие вагины всегда расположено в половой 
клоаке позади отверстия бурсы.
Строение женских половых органов у цестод не ограничивается описанным выше. Существуют и иные варианты морфологического строения 
системы, но общий принцип остается неизменным.
Матка на первом этапе своего развития представляет мышечную 
трубку, берущую начало от оотипа и оканчивающуюся наружным отверстием (лентецы). У цепней матка слепо заканчивается внутри членика. По 
мере своего развития и наполнения яйцами в такой матке появляются вы

пячивания (отростки) в виде ветвей дерева, или образуются мешковидные 
образования, которые в конечном итоге заполняют всю внутреннюю полость членика, постепенно угнетая половые железы, приводя их к атрофии. 
У других цепней матка распадается на яйцевые капсулы: образуются око- 
ломаточные органы, являющиеся измененной паренхимой, в которую яйца 
выходят из матки, где и происходит их дозревание (рис. 12, 13).
Яйца цестод имеют весьма разнообразное строение. По форме яйца 
цестод встречаются овальной, круглой, квадратной или иных конфигураций, с плотной трехслойной скорлупой различного строения (тонкостенные, с крышечкой и без нее, с толстой, радиально исчерченной и др.). 
Сформированные яйца лентецов выходят из матки на стадии зародышевой 
клетки, и только во внешней среде развиваются в первую личиночную стадию, покрытую снаружи ресничками и именуемую корацидием. У цепней 
сформированный зародыш внутри яйца именуется онкосферой. Из матки 
яйца освобождаются после отторжения члеников от стробилы и разрушения их во внешней среде. На переднем полюсе этих яиц может быть крышечка, а на заднем -  шипик-штифтик (рис. 14).
Яйца лентецов выбрасываются во внешнюю среду на стадии зародышевой клетки. Во внешней среде за 2-3 недели внутри яйца формируется онкосфера, заключенная в защитную, реснитчатую -  эмбриональную и 
собственную оболочки, именуемая корацидием (рис. 15).
Внутри корацидия имеются герминативные клетки, которые в процессе дальнейшего развития в промежуточном хозяине разовьются в ткани 
следующей личиночной стадии.
Первой паразитической стадией у псевдофиллид (лентецов) является 
процеркоид. Вышедший из яйца корацидий, плавая в воде, становится добычей пресноводных рачков. В их кишечнике корацидий освобождается от 
реснитчатого покрова, затем проникает в полость тела своего первого промежуточного хозяина (рачка) и превращается в процеркоид. Сложные морфологические изменения онкосферы в процеркоид сопровождаются развитием мышечной ткани и паренхимы, затем развивается покровная ткань, 
образующая на переднем конце ботрии и железы проникновения. На 
заднем конце процеркоида отшнуровывается небольшой придаток -  цер- 
комер, в котором оказываются эмбриональные крючья, утратившие свое 
значение (рис. 16).
Вторая личиночная стадия (плероцеркоид) развивается уже во втором промежуточном хозяине (рыбы, амфибии, рептилии и др.). После проглатывания вторым промежуточным хозяином рачков, пораженных про- 
церкоидами, последние проникают в полость тела, мышцы, печень, и др. 
органы второго промежуточного хозяина, теряют церкомер, увеличиваются в размерах. На переднем конце формирующейся личинки две ботрии 
(ямки), половые железы и их протоки. Инвазионности плероцеркоиды достигают за 6-14 месяцев (рис. 16).

Яйца цестод отряда цепней имеют несколько иное строение. Например, наружная (скорлуповая) оболочка яйца у одних видов (Moniezia ех- 
pansa) плотная, прочная, а других, наоборот, нежная, легко разрушающаяся 
(сем. Taeniidae). Следующие две оболочки называются эмбриофором, 
представлены плацентой -  толстой белковой оболочкой и тонкой прозрачной - липоидной. Формирующаяся в яйце личинка также называется онкосферой. Онкосфера цепней также снабжена тремя парами эмбриональных 
крючьев и железами проникновения (рис. 17).
У анаплоцефалид эмбриофор имеет грушевидную форму и называется грушевидным аппаратом (рис. 18).
У цестод отряда цепней личиночные стадии именуются: цистицер- 
коидами, цистицерками, ценурусами, стробилоцерками, эхинококками, 
альвеококками и др.
Цистицеркоид имеет вздутую переднюю часть с ввернутой внутрь 
головкой вместе с органами прикрепления и задний хвостовой придаток. 
Развиваются цистицеркоиды обычно у беспозвоночных (рис. 19).
Цистицерк -  пузыревидное образование, заполненное достаточно 
прозрачной жидкостью, различной величины (от горошины до величины 
теннисного мяча и более). На внутренней его стенке размещается одна 
ввернутая внутрь головка, такая же, как у цистицеркоида. Снаружи цистицерк окружается соединительнотканной капсулой. В большинстве случаев 
головка в цистицерке полностью сформирована и способна сразу же прикрепляться к слизистой кишечника в случае проглатывания его дефинитивным хозяином.
Цистицерки обычно паразитируют в органах и тканях млекопитающих, реже -  птиц (рис. 19).
Ценур представляет собой пузырь различной величины, заполненный жидкостью, объем которой в некоторых случаях может достигать 500- 
700 мл. На внутренней поверхности стенки пузыря располагаются не один 
сколекс, а множество, и каждый из них дает начало самостоятельной цес- 
тоде.
Локализуются ценуры у промежуточных хозяев (жвачные, свиньи и 
др.) в головном и спинном мозге, мышечной ткани (рис. 19).
Более сложное строение и отличие в размере (более крупная, до величины 10-15 см в диаметре) имеет личинка, именуемая эхинококком.
Эхинококк (однокамерный) -  пузыревидное образование, заполненное жидкостью. Стенка пузыря двухслойная. Наружный слой -  кутикуляр- 
ный -  выполняет функции питания, внутренний -  герминативный (плодовой) -  тонкий, нежный, формирует сколексы (протосколексы), выводковые 
капсулы и дочерние пузыри: в последних, в свою очередь, развиваются 
сколексы и одновременно могут формироваться третичные пузыри (внучатые), в которых также развиваются сколексы. Большое количество отпочковавшихся от герминативной оболочки сколексов и выводковых капсул

образует на дне пузыря так называемый гидатидозный песок.
Снаружи эхинококковый пузырь покрыт слоем измененной, непрозрачной, разной толщины соединительной ткани хозяина.
Локализуются эхинококки у промежуточных хозяев во всех органах 
и тканях всех видов жвачных, всеядных животных и человека.
Эхинококковые пузыри приобретают определенную морфологическую модификацию в зависимости от вида промежуточного хозяина, в котором он паразитирует:
- Echinococcus granulosus (veterinonim) -  развивается в форме одиночного пузыря, в котором развиваются выводковые капсулы со сколекса- 
ми, и отдельные сколексы. Дочерние и внучатые пузыри экзогенного или 
эндогенного развития не встречаются, Эта модификация эхинококкоза 
встречается у овец и свиней, реже -  у человека;
- Echinococcus granulosus (hominis) - различают как эндогенного, так 
и экзогенного развития дочерних и внучатых пузырей со сколексами, Эта 
форма эхинококка чаще встречается у человека и реже -  у животных.
Пузыри, в которых не развиваются ни сколексы, ни выводковые капсулы, называются ацефалоцистами.
Альвеококк (синоним -  многокамерный эхинококк) имеет вид скопления мелких (0,1-0,5 мм) пузырьков (альвеол) неправильной формы, соединенных между собой и содержащих внутри студневидную массу со 
сколексами. Процесс размножения происходит за счет периферийных альвеол, путем почкования.
Хозяевами альвеококков обычно являются грызуны (водяные крысы, 
ондатры и др.) и человек, в печени которых и развивается возбудитель. У 
свиней или жвачных животных альвеококки чаще всего не содержат ско- 
лексов.
Стробилоцерк представляет собой ввернутый, полностью развитый 
сколекс, вооруженный крупными крючьями, с длинной ложночленистой 
стробилой, с небольшим пузырьком на конце. Паразитируют стробилоцер- 
ки в печени грызунов, насекомоядных и др. животных.
Специальных органов, выполняющих функцию пищеварения, у цестод нет. Пищеварение осуществляется через покровную ткань -  кутикулу, 
в связи с чем питательные вещества, необходимые для его развития в данный момент, избирательно всасываются всей поверхностью каждого отдельного членика. Исследования показали, что в тканях цестод имеются 
пептолитические ферменты, которые и участвуют в пристеночной (кути- 
кулярной) обработке пищевой массы, содержащейся в кишечнике хозяина.
За остатки пищеварительной системы у цестод в полной мере можно 
признать так называемый спиралевидный канал, имеющийся у личинок 
цестод -  цистицерков. При исследовании гистологических срезов цисти- 
церков (C.bovis) в спиралевидном канале были обнаружены форменные 
элементы крови хозяина. При попадании цистицерка в дефинитивного хо
ю