Общая микробиология

НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ 

АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

БИОЛОГО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Учебно-методическое пособие

Новосибирск 2012

УДК 579 (075)
ББК 28.4
О – 281

Кафедра экологии

Составитель канд. биол. наук, проф. Л. А. Литвина
Под общей редакцией д-ра биол. наук, проф. А. Г. Незавитина
Рецензент канд. биол. наук, проф. И. В. Тюньков

Общая микробиология: учеб.-метод. пособие / Новосиб. гос. агр. 

ун-т. Биол.-технол. фак. ИЗОП; сост. Л. А. Литвина. – Новосибирск: 
Изд-во НГАУ, 2012. – 136 с.

Учебно-методическое пособие подготовлено в соответствии с Го
сударственным образовательным стандартом по дисциплине «Микробиология» для специальностей 110305.65 – Технология производства 
и переработки сельскохозяйственной продукции, 260301.65 –Технология мяса и мясных продуктов, 260501.65 –Технология продуктов питания и общепита, 080401.65 – Товароведение и экспертиза товаров, 
200503.65 – Стандартизация и сертификация, 020200.62 – Биология, 
111100.62 – Зоотехния с учетом основной направленности теоретического курса микробиологии и материально-технического оснащения лаборатории микробиологии.

Предназначено для лабораторно-практических занятий и самосто
ятельной подготовки студентов биолого-технологического факультета 
очной и заочной форм обучения по освоению курса общей микробиологии.

Утверждено учебно-методическим советом биолого-технологиче
ского факультета (протокол № 9 от 26 апреля 2011 г.) и учебно-методической комиссией Института заочного образования и повышения квалификации Новосибирского государственного университета (протокол 
№ 4 от 16 мая 2011 г.)

©Новосибирский государственный аграрный университет, 2012

ВВЕДЕНИЕ

Уважаемые студенты!

Вы пришли в лабораторию микробиологии. Здесь вы по
знакомитесь с чрезвычайно интересным, но необычным миром – миром микробов. Необычность его состоит не только в том, что он невидим невооруженным глазом, а в том, 
что он вообще не воспринимается ни одним из наших органов чувств. Поэтому для изучения микроорганизмов пользуются нестандартными методами, освоение которых 
представляет определенные трудности. Будьте к этому 
готовы и не огорчайтесь, если с первого раза ваша работа не будет слишком успешной. Систематические занятия 
и помощь преподавателя обеспечат выполнение вами всего 
объема необходимых исследований.

Знакомство с микробиологией – наукой о жизни малых 

существ – для студентов биолого-технологического факультета состоится в лаборатории микробиологии при изучении 
разделов «Общая микробиология» для всех направлений 
и «Специальная микробиология» для каждого направления 
специальности.

При изучении общей микробиологии студенты сначала 

знакомятся с правилами работы в микробиологических лабораториях, а затем осваивают методы исследования морфологии и физиологии микроорганизмов, которыми пользуются все микробиологи – ветеринарные, медицинские и др.

Результаты микробиологических исследований и опы
тов, сделанных в лаборатории, студенты заносят в рабочие 
тетради, которые помогают продолжить работу по данным 
темам во внеаудиторное время.

Перечень контрольных вопросов и литература для под
готовки к занятию даны в конце каждой темы.

Сведения, полученные студентами на занятиях по общей 

микробиологии, способствуют развитию представления 

о многообразии мира микробов, об универсальности клетки 
как единицы всей живой материи и о роли микроорганизмов 
в жизни нашей планеты. Для специалистов-технологов создается база для усвоения специальной микробиологии, где 
рассматриваются технически значимая микрофлора, а также 
микроорганизмы, вызывающие порчу продукции. Для специальностей «Технология мяса и мясных продуктов», «Товароведение и экспертиза товаров», «Технология продуктов 
питания и общепита» изучение общей микробиологии способствует дальнейшему пониманию вопросов, связанных 
с передачей микроорганизмов, возбудителей инфекционных 
заболеваний, через животноводческую продукцию человеку, что может вызвать его заболевание.

В результате изучения общей микробиологии студенты 

должны овладеть техникой микроскопирования и приготовления мазков препаратов, а также различными методами их 
окрашивания. Эти навыки будут использованы при изучении качества мяса и молочных продуктов, а также при изучении микрофлоры почвы, воды, воздуха и др.

В конце данного пособия приведен краткий словарь ми
кробиологических терминов и понятий, пользуясь которым, 
студенты могут узнать точное толкование того или иного 
термина, его дословный перевод с латинского или греческого языков. Кроме того, в этом разделе приведены сведения 
о систематике микроорганизмов, что позволит ознакомиться 
с современным представлением о распределении микроорганизмов между отделами, основанным на разнице в строении и составе клеточной стенки бактерий.

Общая трудоемкость дисциплин

«Микробиология» для специальности «Технология про
изводства и переработки сельскохозяйственной продукции» – 90 ч, из них аудиторные занятия – 40, лекции – 22, 
лабораторные работы – 18, самостоятельная работа – 50 ч.

«Биология и микробиология» для специальности «Тех
нология мяса и мясных продуктов» – 72 ч, из них аудиторные занятия – 30, лекции – 16, лабораторные работы – 14, 
самостоятельная работа – 42 ч.

«Основы микробиологии» для специальности «Товаро
ведение и экспертиза товаров» – 100 ч, из них аудиторные 
занятия – 50, лекции – 24, лабораторные работы – 26, самостоятельная работа – 60 ч.

«Микробиологии» для специальности «Технология про
дуктов питания и общепита» – 102 ч, из них аудиторные занятия – 50, лекции – 26, лабораторные работы – 24, самостоятельная работа – 52 ч.

«Микробиология» для специальности «Стандартизация 

и сертификация» – 90 ч, из них аудиторные занятия – 42, 
лекции – 22, лабораторные работы – 20, самостоятельная 
работа – 48 ч.

«Микробиология» для специальности «Биология» –- 3 

зач. ед., из них аудиторные занятия – 108 ч, лекции – 20, 
лабораторные работы – 34, самостоятельная работа – 54 ч.

В процессе занятий выполняется одна контрольная ра
бота. По завершении курса сдается экзамен.

1. ОРГАНИЗАЦИЯ, ОБОРУДОВАНИЕ 
И ПРАВИЛА РАБОТЫ В УЧЕБНОЙ 

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ

План

1. Правила работы в микробиологической лаборатории.
2. Оборудование учебной микробиологической лабора
тории.

3. Оборудование рабочего стола.
4. Техника работы с бактериологической петлёй, про
биркой, спиртовкой.

5. Организация работы бактериологической лаборатории 

по исследованию продовольственного сырья и продуктов.

6. Классификация патогенности микроорганизмов, дей
ствующая на территории Российской Федерации.

7. Классификация патогенности микроорганизмов Все
мирной Организации Здравоохранения.

1.1. Правила работы 

в микробиологической лаборатории

По своему назначению микробиологические лаборато
рии могут быть диагностическими, научно-исследовательскими (в которых выявляются возбудители заболеваний 
животных и человека), контрольными (на мясокомбинатах, 
молочных, хлебных, пивоваренных, дрожжевых заводах) 
и учебными.

В условиях учебной микробиологической лаборатории 

студенты обычно знакомятся с сапрофитными микроорганизмами, т. е. не патогенными для человека. Но следует 
иметь в виду, что при посеве различного материала на питательные среды могут быть выявлены патогенные формы. 
В связи с этим правила работы в микробиологическом практикуме университета являются общими с правилами работы 

в любой другой бактериологической лаборатории и сводятся в основном к следующему:

1.1. Работать в лаборатории следует в халате и ша
почке на постоянно закрепленном за студентом месте.

1.2. На рабочем месте должно быть установлено только 

оборудование и не должно находиться ничего лишнего.

1.3. Во время работы необходимо соблюдать опрят
ность и чистоту, не допуская разлива и разбрызгивания 
культур.

1.4. При работе со спиртовкой зажигать ее только с по
мощью спичек. Гасить спиртовку следует только колпачком, 
который завертывают на горловине спиртовки после окончания работы.

1.5. В помещении лаборатории нельзя принимать пищу, 

пить воду, допускать излишние разговоры, а при пользовании пипетками брать их в рот.

1.6. Использованные предметные и покровные стекла, 

шпатели помещают в сосуд с дезинфицирующим раствором 
(3 %-й раствор фенола или 1 %-й раствор хлорамина). Пинцеты, бактериологические петли и другие металлические 
предметы перед тем, как использовать или поставить на место, необходимо прожечь в пламени спиртовки.

1.7. Чашки Петри и пробирки, засеянные культурами 

микроорганизмов, ставят в термостат, предварительно написав на них восковым карандашом фамилию исследователя, номер группы и дату посева.

1.8. При случайном попадании культуры микроорга
низмов на предметы или одежду последние необходимо 
продезинфицировать 3 %-м раствором фенола с помощью 
ваты и пинцета. Вату после обработки опустить в сосуд 
с дезинфицирующим раствором, который находится на лабораторном столе.

1.9. После окончания работы необходимо навести по
рядок на своем столе, микроскоп закрыть чехлом, халат 

и шапочку убрать в полиэтиленовый пакет, а руки тщательно вымыть с мылом.

1.10. Перед уходом из лаборатории необходимо сдать 

свой стол дежурному студенту, который сдает аудиторию 
дежурному лаборанту.

1.2. Оборудование учебной 

микробиологической лаборатории

Наличие определенного оборудования в лаборатории 

диктуется исследованиями, проводимыми в ней.

Термостат – прибор, в котором автоматически поддер
живается постоянная температура (рис.1). Он необходим 
для культивирования микроорганизмов, так как они не имеют механизмов, регулирующих собственную температуру, 
и принимают ее из окружающей среды.

Культивирование – выращива
ние микроорганизмов на питательных средах при заданной температуре в условиях лаборатории.

Микроорганизмы тела животно
го и человека хорошо развиваются 
при температуре 37–38 °C и считаются мезофилами (от греч. мезо –
средний, фило – люблю), поэтому 
при их культивировании в термостате устанавливают именно такую 

температуру. К мезофилам относятся и патогенные для теплокровных микроорганизмы. Температура развития 25–390С.

Термофилы (от греч. термо – тепло) развиваются при 

более высоких температурах (40–80 °C). При выращивании 
их в термостате устанавливают температуру в этих пределах. Термофилы широко распространены в природе и участвуют в процессах самонагревания зерна, сена, навоза.

Рис. 1. Термостат

Психрофилы (от греч. психрос – холод) хорошо растут 

при низких температурах (+15…–80С). К ним относят почвенные и морские микроорганизмы, а также вызывающие 
болезни рыб и водных растений. Психрофилы выращивают 
без термостата.

Культивирование 
микроорганизмов 
осуществляется 

в основном в обычных условиях, т. е. при доступе кислорода. Микроорганизмы, растущие при доступе кислорода и использующие его для окисления органических веществ с освобождением из них энергии, называются аэробами. Часть 
микроорганизмов относится к анаэробам (от греч. ан – отриц., аэр – воздух). Кислород для анаэробов оказывается 
даже токсичным, так как образующаяся при доступе кислорода перекись водорода (Н2О2) ядовита для клеток, а расщепляющего ее фермента – каталазы – у анаэробов нет. Предложены различные методы культивирования анаэробов, одним 
из которых является выращивание анаэробов в анаэростате.

Анаэростат (от др.– греч. ἀν- – отрицательная частица, 

др.– греч. ἀήρ – воздух и στατός – стоящий, неподвижный) – 
прибор, предназначенный для культивирования в чашках 
Петри микроорганизмов группы облигатных анаэробов 
и микроаэрофилов (рис. 2). Толстостенный металлический 
прибор, из которого можно с помощью вакуумного насоса 
откачать воздух.

Степень откачивания опре
деляется по манометру. Внутрь 
прибора помещают чашки Петри 
или пробирки с посевами, откачивают воздух до 0,5–0,8 атм, 
разъединяют с насосом и ставят 
в термостат при нужной температуре. Вмещает до 14 чашек.

Рис.2. Анаэростат

Стерилизация – один из важнейших и необходимых 

приемов в микробиологической практике. В переводе с латинского термин обозначает обеспложивание, а в микробиологии – уничтожение микроорганизмов и их спор. Микробиология стерилизует питательные среды, на которых 
культивируются микроорганизмы, стеклянную посуду, инструменты для того, чтобы избежать попадания посторонних микроорганизмов. Для стерилизации используют автоклавы, аппарат Коха и другие приборы.

Автоклав – прибор, предназначенный для прогревания 

стерилизуемого объекта насыщенным паром при давлении 
выше атмосферного.

Это массивный двустен
ный котел, между стенками которого наливают воду (рис. 3). 
Внутренняя часть котла представляет собой камеру, в которую помещают стерилизуемый 
материал и куда поступает пар 
от нагреваемой воды. Автоклав 
герметически закрывается массивной крышкой. Давление, 
создающееся в стерилизационной камере, определяют по 
манометру. Нормальное атмосферное давление (760 мм рт. 
ст.) принимают за нуль, а давление в 1 атм на манометре со
ответствует 1 атм сверх нормального. Автоклав выдерживает давление до 3 атм, при этом температура кипения будет 
144 °C. Режим работы автоклава может быть различным 
в зависимости от стерилизуемого объекта. Например, 0,7 атм 
при температуре 115 °C, время стерилизации 30 мин – для 

Рис. 3. Автоклав