Диагностика трематод - возбудителей болезней сельскохозяйственных животных

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ

Государственное образовательное учреждение 
высшего профессионального образования

МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ 
ПРИКЛАДНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ

(МГУПБ)

Кафедра «Инфекционные и паразитарные болезни 
сельскохозяйственных животных»

ПАРАЗИТОЛОГИЯ

ДИАГНОСТИКА ТРЕМАТОД -  ВОЗБУДИТЕЛЕЙ 
БОЛЕЗНЕЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ 
ЖИВОТНЫХ

Методические указания к выполнению лабораторных и 
самостоятельных работ для студентов 
ветеринарно-санитарного факультета

МОСКВА 2006

Составители: Н.Е. Косминков, д.в.н., проф. 

Б.К. Лайпанов, д.в.н.

Методические указания предназначены для выполнения лабораторных работ студентами ветеринарно-санитарного факультета.

Методические указания могут быть использованы для выполнения 
курсовых работ и при прохождении производственной практики в животноводческих хозяйствах и мясоперерабатывающих предприятиях.

Утверждены Советом по издательской деятельности МГУПБ.

© МГУПБ, 2006

ВВЕДЕНИЕ

Цель настоящих методических указаний -  научить студентов ветеринарно-санитарного факультета использовать в процессе обучения прижизненные и посмертные методы диагностики возбудителей трематодозов у 
животных.
Трематоды, или плоские черви -  биогельминты, паразитирующие в 
половозрелой стадии своего развития в органах и тканях позвоночных животных и человека. Личиночные стадии трематод развиваются в промежуточных (моллюски) и дополнительных (членистоногие, рыба и т.д.) хозяевах.
Тело трематод сплющено в дорзовентральном направлении, снаружи 
покрыто кутикулой, имеет, в большинстве случаев, ротовую и брюшную 
присоски, почти все трематоды гермафродиты, исключением являются 
представители подотряда Schistosomata.
Трематоды относятся к типу плоских червей -  Plathelminthes, классу 
Trematoda.
Наибольшее значение для ветеринарии представляют трематоды подкласса Prosostomidea, включающего 12 подотрядов, из которых представители пята нередко вызывают тяжелые заболевания, преимущественно у 
жвачных и птиц: Fasciolata, Paramphistomata, Notocotylata, Echinostomata и 
Schistosomata.

ТРЕМАТОДЫ, ИЛИ СОСАЛЬЩИКИ

Кп. Trematoda Rud., 1808

Паразитические черви, тело которых приплюснуто в дорзовентральном направлении. Встречаются трематоды с валикообразным телом. Большинство трематод имеют фиксаторные органы в виде присосок. Присоски 
располагаются в большинстве случаев на вентральной поверхности переднего и заднего концов тела. Присоски являются мышечными органами, и в 
некоторых случаях снабжены хитиновыми образованиями в виде крючков 
или шипиков. Поверхность тела трематод покрыта кутикулой, под которой 
располагаются мышечные волокна. Нервная система представлена ганглиями, от которых отходят кзади три пары продольных нервов, соединенных 
между собой рядом коммиссур. Рот открывается субтерминально или терминально. Кишечник представлен двумя трубками, которые у некоторых 
видов образуют многочисленные ответвления. Трематоды в большинстве 
случаев являются гермафродитами, реже -  раздельнополыми.
Прямое развитие характерно для моногенетических трематод, а у ди- 
генетических трематод оно происходит с участием промежуточных хозяев.
Дефинитивными хозяевами трематод в большинстве случаев являются позвоночные животные, а промежуточными хозяевами -  обычно моллюски. В ряде случаев имеются и дополнительные хозяева.

з

Все трематоды делятся на два подкласса:
- Digenea Cams (1863) -  трематоды с одним экскреторным отверстием. 
Матка имеет множество петель с большим количеством яиц, развитие происходит с участием промежуточного хозяина. В большинстве случаев это 
эндопаразиты;
- Monogenea Cams (1863): трематоды с двумя экскреторными каналами; матка содержит одно яйцо; развитие прямое; эктопаразиты.

Подкласс Digenea Carus (Л 8631

Тело дигенетических трематод сплющено в дорзовентральном направлении или имеет цилиндрическую форму, в большинстве случаев его 
длина превышает ширину. Размеры тела дигенетических трематод весьма 
разнообразны: от долей миллиметра - до 7-8 см длины и более. Форма тела 
-  от лентовидной до очень утолщенной с расширенным головным концом, 
образованием так называемого воротника, или перетяжками (рис. 1).

Рис. 1. Fasciola hepatica

Органами фиксации у дигенетических трематод являются мышечные 
присоски, нередко имеются дополнительно хитиновые крючья или шипики.
У дигенетических трематод одна или две присоски. Различают ротовую присоску, расположенную на переднем конце тела, в центре которой 
располагается ротовое отверстие. Брюшная присоска обычно располагается 
на вентральной поверхности тела трематоды и служит только для прикрепления к тканям хозяина. У некоторых трематод брюшная присоска сдвинута 
в хвостовую часть тела. У ряда трематод может быть и третья присоска (половая) или всего лишь одна -  ротовая. Встречаются трематоды, у которых 
присосок нет (рис. 2)

Рис. 2. Расположение присосок мариты:

а - Fasciola, б - Piagiorchis, в - Rhodotrema, г - Gymnophallus, д - Accaciadium, 
е - Diplodiscus, ж - Notocotylus, з - Diacetabulum, и - Bucephalus, к -  Cotylurus.

Хитинизированные образования на кутикуле у дигенетических трематод встречаются редко. Эти образования могут встречаться в виде щетинок, 
шипиков, или крючков, располагающихся на всей поверхности или только 
на части тела (рис. 3).

Тело трематод покрыто цитоплазматическим тегументом и в сочетании с мускулатурой и паренхимой образует так называемый кожномышечный мешок. Тегумент условно разделяют на наружный и внутренний. Наружный слой представляет собою безъядерный синцитий, ограниченный от внутреннего слоя базальной мембраной, которая пронизывается 
выростами цитоплазмы, соединяющей наружный и внутренний слои тегу- 
мента. Снаружи тегумент покрыт уплотненным слоем изрезанного безъядерного синцития.
В слое безъядерного синцития располагаются кутикулярные шипики. 
Шипики располагаются на теле трематод упорядоченно или беспорядочно. 
У некоторых видов шипики располагаются только вокруг ротового отверстия или на копулятивном аппарате. В тегументе располагается также и ряд 
железистых клеток, выполняющих разные функции. Они располагаются или 
около ротовой присоски^ или на вентральной поверхности трематоды. К железам относится и так называемый орган Брандеса, играющий роль в «наружном пищеварении». В составе тегумента выявлены нейтральные и кислые мукополисахариды. Как считают, они выполняют защитную роль от 
воздействия пищеварительных ферментов хозяина. Вся толща тегумента 
пронизана нервными окончаниями.
Вглубь за базальной мембраной располагаются слои гладких мышц 
различной направленности (рис. 4).
Паренхима. У трематод отсутствует полость тела, а пространство 
внутри кожно-мышечного мешка заполнено паренхиматозной тканью, состоящей из недифференцированных клеточных элементов, считающихся 
опорной тканью для внутренних органов. Клетки паренхимы сильно вакуо- 
лизированы, располагаются в отдельных местах очень рыхло, создавая ще

Рис. 4. Схема строения покровов мариты по данным электронной 
микроскопии:

ит - Наружная часть тегумента (безъядерный принцип), пт - погруженная 
часть тегумента (клеточные элементы с ядрами), кш -  кутикулярные шипики, 
мт -  митохондрии, 6м -  базальная мембрана, ц -  цитоплазматические тяжи, 
соединяющие наружную и погруженную часть тегумента, яд -  ядра, км -  кольцевые мышцы, им -  продольные мышцы, мк -  межклеточное вещество.

ли, лакуны, заполненные жидкостью. В паренхиме также откладываются 
запасы гликогена. Паренхиму представляют в основной массе недифференцированные мезенхимные клетки (Р-клетки), а также гемоциты, а-клетки, 
миобласты. Значение паренхимы очень велико, она выполняет важную роль 
в процессах обмена веществ, эмбриогенеза и т.д. В паренхиме ряда трематод расположены каналы, заполненные жидкостью, которую приравнивают 
к крови или лимфе, в которой находятся клеточные элементы, приравненные к гемоцитам. Названные каналы в большинстве случаев располагаются 
вдоль кишечных стволов, что, вероятно, способствует переносу пищевых 
веществ во все органы и ткани трематод. Наблюдения ряда ученых показали, что паренхима несет экскреторную функцию. Гемоциты, наполненные 
продуктами обмена, мигрируют из паренхимы в кишечник, а из него при 
антиперистальтике через ротовое отверстие наружу.
Пищеварительная система трематод начинается ротовым отверстием, 
расположенным на дне ротовой присоски затем следует мышечная шаровидная или овальная глотка, переходящая в короткий пищевод, который

разделяется на две трубки кишечника. У части трематод между ротовым отверстием и глоткой имеется короткая тонкая трубка, именуемая предглот- 
кой (praepharynx). Ряд трематод (сем. Paramphistomatidae, Notocotylidae и 
др.) не имеют глотки, ее функции выполняет видоизмененная ротовая присоска. У других пищевод имеет выпячивания, в которых располагаются 
особые железы.
Кишечник трематод в большинстве случаев представлен двумя слепо 
заканчивающимися стволами. У трематод рода Fasciola стволы кишечника 
образуют множество ответвлений; у рода Cyclocotilum стволы кишечника в 
задней части тела соединяются, образуя как бы кольцо; у рода Tubilarium 
оба ствола кишечника открываются на заднем конце тела трематод самостоятельным анальными отверстиями; у некоторых представителей сем. 
Echinostomatidae кишечные стволы сливаются с экскреторным пузырем и, 
таким образом, выделительное отверстие выполняет и функцию освобождения кишечника (рис. 5)

Рис. 5. Основные типы строения пищеварительной системы мариты:

а -  Fasciola, б -  Plagiorchis, в -  Cyclocoelum, г -  Aporocotyle, д -  Jubilarium, 
е -  Bilharzia, ж -  Gymnophallus, з -  Prosorhynchus.

Выделительная система трематод представлена мерцательными клетками, сетью экскреторных канальцев различного диаметра и экскреторного 
пузыря с протоком, открывающимся наружу. Мерцательная клетка состоит

g

из звездчатой части' (рис. 6). От каждой клетки отходят экскреторные капилляры, которые собираются в более крупные, а затем в два крупных сосуда, каждый из которых самостоятельно впадает в экскреторный пузырь (рис. 
7).

Рис. 6. Схема строения мерцательной клетки:

А -  поперечный срез канальца циртоцита, Б -  мерцательная клетка, 
п -  палочки, кц -  каналец циртоцита, тк -  тело клетки.

Выбрасывание продуктов обмена из пузыря осуществляется через 
проток, обычно открывающийся терминально на заднем конце тела. Имеются виды трематод, у которых экскреторные отверстия сдвинуты на дорзальную сторону тела или дорзально на переднем конце на уровне пищевода

1 Каждая мерцательная клетка имеет крупное ядро и окаймлена ресничками, называемыми мерцательным эпителием, имеет вид воронки, от узкого края которой берет начало 
выделительный капилляр.

и т.д. Каждый из двух клапанов собирает экскреты с левой или правой половины тела трематоды. У некоторых трематод число впадающих в экскреторный пузырь протоков может быть и больше двух и, соответственно, каждый из них собирает экскреты с определенного участка тела.
Форма пузыря варьирует от мешковидной до V-образной, Y-образной 
и т.д. Размеры пузыря у трематод варьируют от едва заметных до размеров, 
занимающих до трети тела и более.
Помимо описанной экскреторной системы у многих трематод существует сеть каналов, соединяющихся с крупными собирательными каналами 
или непосредственно с экскреторным пузырем. Эту сеть каналов называют 
резервной.
У трематод выявлена и третья разновидность каналов, которую назвали лимфатической системой. Эта сеть каналов не сообщается ни с внешней 
средой, ни с органами, ни с выделительной системой. Лимфатическая сеть 
может быть представлена двумя боковыми неветвящимися каналами, либо 
сетью капилляров, пронизывающих всю паренхиму тела трематод. Все 
лимфатические каналы сокращаются, в результате чего их жидкое содержимое постоянно находится в движении.
Нервная система трематод представлена центральным кольцевидным 
ганглием, расположенным в первой трети тела, обычно на уровне глотки 
или пищевода. В некоторых случаях центральное нервное кольцо у трематод состоит из двух ганглиев, соединенных комиссурами. От центрального 
мозгового ганглия к переднему концу тела отходят три пары нервных стволов, от которых отходит множество нервных ответвлений, пронизывающих 
тегумент и особенно - ротовую присоску. Три пары нервных стволов, отходящих кзади, представлены двумя вентральными, двумя латеральными и 
двумя дорзальными нервными стволами, где каждая пара сливается, образуя 
арку. Наиболее сильно развиты вентральные стволы, которые, как и другие, 
соединены между собою множеством комиссур с отходящими от них нервными веточками, пронизывающими все органы и ткани, лежащие позади 
нервного ганглия (рис. 8)
Половая система дигенетических трематод в большинстве случаев 
является гермафродитной и только представители сем. Shistosomatidae (паразиты крови теплокровных животных) представлены самцами и самками 
(рис. 9).
Мужская половая система у гермафродитных трематод представлена 
семенниками, семяпроводами, семенным пузырьком и совокупительным органом -  циррусом. Число семенников варьирует от одного до множества, но 
в большинстве случаев их бывает только два. По своей форме семенники 
бывают округлыми, овальными, лопастными или даже ветвящимися и др.
Располагаются семенники в теле трематод в большинстве случаев позади брюшной присоски и реже -  кпереди от нее (рис. 10).

ю