Бабезиоз собак в Оренбургской и Московской областях


На правах рукописи






БЕЛИМЕНКО
Владислав Валерьевич





                Бабезиоз собак в Оренбургской и Московской областях





03.00.19 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук














Москва
2008

Работа выполнена в ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко» и ФГОУ ВПО «Оренбургский государственный аграрный университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук
Георгиу Христофис

Официальные оппоненты: 3 аслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Горохов Владимир Васильевич

                         Заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Дьяконов Лев Петрович

Ведущая организация: Мс сковская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Ссрябина



Защита диссертации состоится «»2008 г. в чассс на
заседании Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 006.011.01 при Всероссийском научно-и с следовательском институте гельминтологии имени К.И. Скрябина (ВИГИС) по адресу: 117218, г. Москва, Б. Черемушкинская ул. 28.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научноисследовательского института гельминтологии имени К.И. Скрябина




Автореферат разослан «»2008 г.


Ученый секретарь
Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций, доктор биологических наук


В. К. Бережко

2

            1. Общая характеристика работы.


       Актуальность темы. Собака - первое животное, одомашненное человеком. С тех пор собака является его постоянным спутником и верным другом. Однако, приручив собаку, человек взял на себя ответственность заботиться об ее здоровье. Одним из самых серьезных, смертоносных и широко распространенных заболеваний, поражающих собак, является бабезиоз.
       Бабезиоз собак - природно-очаговое протозойное трансмиссивное кровепаразитарное заболевание, вызываемое простейшим паразитом Babesia canis. Болезнь протекает сверхостро (молниеносно), остро и хронически.
       По данным многих авторов, на долю данного заболевания приходится от 14 до 18% от общего количества собак, которым были оказаны ветеринарные услуги. Кроме того, согласно статистическим данным в течение последних 10 лет заболеваемость собак бабезиозом возросла в несколько раз (Бондаренко М., 1998; Рыщанова Р.М., 2000; Христиановский П.И., 2005; Кошелева М.И., 2006).
       Кроме того, с последние годы бабезиоз у собак протекает без характерных клинических признаков и без летального исхода. Однако, при исследовании мазков крови, окрашенных по Романовскому-Гимза, обнаруживаются бабезии, а сыворотки крови от этих собак дают положительный результат в серологических реакциях. Это указывает на носительство Babesia canis. Диагноз лечащими врачами, как правило, ставится совершенно иной.
        Цели и задачи исследования. В процессе выполнения настоящей работы перед нами была поставлена цель - изучить некоторые аспекты эпизоотологии заболевания в условиях городов Московской и Оренбургской области, усовершенствовать методы лечения бабезиоза собак. Для этого следовало решить следующие задачи:
•   Изучить особенности эпизоотологии бабезиоза собак в условиях Московской и Оренбургской областей. Изучить сезонную, возрастную и породную динамику заболеваемости собак бабезиозом. О пределить распространенность бабезиоза собак в этих регионах.
•   Выяснить процент бабезионосителей среди беспризорного поголовья собак г. Москвы и г. Оренбурга.
•   Выяснить видовой состав иксодофауны в г. Оренбурге. В ыявить зоны заклещеванности в пределах города и сроки их активности.
•   Изучить гематологические и биохимические показатели крови, а оокже уровень иммуноглобулинов при разной степени тяжести течения болезни.
•   Провести клиническое испытание различных противобабезийных препаратов при бабезиозе собак. Поовести клиническое испытание сниженных доз батризина и фатрибанила (Fa.Try.Banil). Уточнить и дополнить схему симптоматической терапии при бабезиозе собак.

3

       Научная новизна. Проведено исследование беспризорных собак с помощью серологических реакций (РИГА и РДСК), а также с помощью микроскопии окрашенных по Романовскому-Гимза мазков крови с целью выявления бабезионосителей. В результате было выявлено, что в Оренбурге и Москве почти половина (49 и 48,3% соответственно) исследованных клинически здоровых собак являются бабезионосителями.
       Изучена распространенность бабезиоза собак в Московской и Оренбургской областях, сезонная, возрастная и породная структура заболеваемости собак бабезиозом. В результате было выявлено широкое распространение данного заболевания в этих регионах. Наблюдается две волны заболевания - весенняя и осенняя. Пики приходятся на май и сентябрь. Не смотря на значительную географическую удаленность, отмечается схожесть эпизоотологии заболевания в обоих регионах.
       Определен видовой состав иксодофауны г. Оренбурга и сроки ее активности. Выявлено, что сто во многих зелёных насаждениях города Оренбурга встречаются клещи следующих видов: Dermacentor pictus, D. marginatus, Rhipicephalus rossicus, Ixodes ricinus. Абсолютное большинство в иксодофауне г. Оренбурга составляют клещи рода Dermacentor (98,4%), причем вид D. pictus незначительно превалирует над видом D. marginatus (51,5 и 48,9% ст общего числа собранных клещей соответственно). Клещи Rhipicephalus rossicus обнаруживались в виде единичных экземпляров в лесах и лесопосадках вдоль поймы р. С скмара в районе Степного поселка и г. Маяк.
        Проведено испытание различных противобабезийных препаратов и их сниженных доз при бабезиозе собак. Выселена возможность эффективного применения батризина и фатрибанила в пониженной дозе - 2,5 мг/кг по ДВ.
        Практическое значение работы. На основании выполненных исследований разработаны и внедрены «Методические рекомендации по выявлению природных очагов пироплазмозов животных» и «Методические рекомендации по борьбе с бабезиозом собак в условиях современного города», рассмотренные и одобренные Ученым Советом Оренбургского ГАУ (Протокол № 5 от 30 января 2008 г.) и на Секции «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (Протокол № 1 от 28 февраля 2008 г.)
        «Методические рекомендации по выявлению природных очагов пироплазмозов животных» допущены Министерством сельского хозяйства Российской Федерации в качестве Учебного пособия для студентов высших учебных заведений, о бучающихся по специальности 111201 - «Ветеринария» (№ 13.03-3/315 от 04 марта 2008 г.).
        Апробированные в ходе работы дополнения к схемам лечения позволяют повысить эффективность терапии, избежать токсических явлений и осложнений, существенно снизить летальность при бабезиозе собак. Применение пониженных доз противобабезийных препаратов позволяет уменьшить их расход и, следовательно, снизить себестоимость лечения.

4

        Апробация полученных результатов. Результаты исследований доложены на Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летию научной деятельности Л.П. Дьяконова (Москва, 2006), Секции «Инвазионные болезни» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (Москва, 2008). По материалам исследований опубликованы 4 научные работы в изданиях, р екомендованных ВАК РФ.
        Личный вклад соискателя. Представленная диссертационная работа является результатом четырехлетних научных исследований автора. Исследования по изучению распространения бабезиоза собак в Оренбургской и Московской областях, иксодофауны города Оренбурга, испытание различных противобабезийных препаратов и сниженных доз батризина и фатрибанила (Fa.Try.Banil) при бабезиозе собак аспирантом выполнены лично.
        В опубликованных работах совместно с научным руководителем X. Георгиу и П.И. Христиановским основная часть экспериментальной работы выполнена В.В. Белименко. Георгиу X. и Христиановский П.И. не возражают в использовании результатов совместных исследований диссертантом В.В. Белименко ( справки представлены в Диссертационный Совет).
        Работа выполнялась под научным руководством доктора биологических наук X. Георгиу, который оказывал научно-м етодическую помощь в проведении исследований и анализе полученных результатов. Основные положения, выносимые на защиту диссертации.
1. Бабезиоз собак в Оренбургской и Московской областях.
2. Б абезионосительство среди беспризорного поголовья собак г. Москвы и г. Оренбурга, его возрастная структура.
3. Видовой состав иксодофауны г. Оренбурга, з оны заклещеванности в пределах города и сроки их активности.
4. Р езииьтаты клинического испытания различных противобабезийных препаратов в различных дозах при бабезиозе собак.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 125 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список литературы. Текст диссертации иллюстрирован 17 таблицами, 8 рисунками, 10 ф отографиями Список использованной литературы включает 242 источника, из них 129 иностранных.


            2. Собственные исследования.
            2.1. Материалы и методы.


       Настоящая работа выполнялась в 2004-2008 гг. в лаборатории протозоологии ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Ковсленко и на кафедре паразитологии и эпизоотологии факультета ветеринарной медицины Оренбургского государственного аграрного университета.

5

       В Оренбургской и Московской областях распространенность бабезиоза собак изучали в 2004-2006 гг. на основании анализа данных первичной отчетной документации по регистрации больных животных и результатов лабораторных исследований. Ди аан оз на бабезиоз ставили по данным анамнеза и результатам исследований мазков периферической крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Кроме того, а ашоротки крови исследовали с помощью серологических реакций.
       Для выявления бабезионосителей среди собак нами были исследованы с помощью серологических реакций сыворотки от клинически здоровых животных. Для подтверждения диагноза проводилось микроскопическое исследование мазков периферической крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
       Для изучения видового состава иксодофауны г. Оренбурга проводили сборы клещей в различных районах города. На местности клещей собирали с помощью флажка и волокуши. Пар аллельно проводили сборы клещей непосредственно с животных с помощью владельцев и ветеринарных врачей. Собранных клещей типизировали по определителю, используя бинокулярную лупу. При этом велась микрофотосъемка клещей.
       Паразитологические исследования заключались в микроскопии мазков из периферической крови, фиксированных в метиловом спирте и в дальнейшем окрашенных по Романовскому-Гимзе. Согласно рекомендациям Ятусевича А.И., Заблоцкого В.Т. (1995), при микроскопии учитывались следующие морфологические признаки: величина, внутриклеточное расположение ( на периферии или в центре эритроцита), количество паразитов в одном эритроците, наличие типичных диагностических форм, паразитемия.
       Реакцию длительного связывания комплемента ставили согласно Наставлению по применению набора компонентов для диагностики гемоспоридиозов животных в реакции длительного связывания комплемента. Для совершенствования серологической диагностики бабезиоза собак была применена реакция непрямой гемагглютинации (Георгиу Хр., 2005).
       В опытах по изучению действия различных доз противобабезийных препаратов, а также в опытах по сравнительному изучению их активности было использовано 24 беспородных щенка в возрасте 2-3 месяца.
       Концентрацию сывороточных имуноглобулинов (IgG, IgM, IgA) у 6 больных, 23 бабезионосителей и 7 здоровых (контроль) со бак в возрасте от 6 месяцев до 9 леа апределяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по G. Manchini et al. (1965) в лаборатории иммунологии ВИЭВ.
       Основные результаты исследований обработаны биометрически с использованием критерия Стьюдента.

6

            2.2. Результаты исследований.
            2.2.1. Бабезиоз собак в Московской области.


       Распространенность бабезиоза собак, сезонную динамику заболевания, возрастную и породную структуру больных собак изучали в 2004-2006 гг. в Северном, Северо-Западном, Северо-Восточном, ЮгоВосточном и Центральном округах г. Москвы и городах Московской области (Долгопрудный, Икша, Красногорск, Реутов).
       Проведенное в течение 2004-2006 гг. эпизоотологическое обследование показало, что бабезиоз собак практически повсеместно распространен в Московской области. 0 об олевание регистрируется с конца марта по ноябрь и имеет два четко выраженных пика: о мае и в сентябре (Рис. 1). Однако в конце 2006 года из-оо топоой поздней зимы единичные случаи бабезиоза собак были отмечены даже в ноябре.
       Всего, по данным 6 московских клиник, за период 2004-2006 гг. была оказана ветеринарная помощь 10697 собакам. Количество больных бабезиозом составило 964 (9% от общего числа животных). Причем, экстенсивность инвазии была практически на одном уровне (Табл. 1). Подобное явление не характерно для эпизоотологии этого заболевания, наблюдаемой в последние годы. По данным многих авторов (Балагула Т.В., 2000, Кошелева М.И., 2003), в 1995-2003 гг. но оерритории Москвы и Московской области отмечался резкий рост заболеваемости собак бабезиозом

Таблица 1. Ди намика заболеваемости собак бабезиозом в Московской области в 2004-2006 гг.

   2004 г.          2005 г.           2006 г.        
Число Случаев % Число Случаев  %  Число Случаев  %  
собак бабезио   собак бабезио     собак бабезио     
        за              за                за        
3365    303   9 3819    352   9,2 3513  309     8,87

Для выяснения закономерностей все статистические данные были

разделены по нескольким признакам. По полу животные разделились следующим образом: кобели - 559 особей (58%), суки - 405(42%). Какой-либо зависимости заболеваемости собак бабезиозом от пола нами выявлено не было. Однако, возможно, это связано с тем, что поголовье кобелей в московской популяции несколько больше, чем самок. По данным Кошелевой М.И. (2006), соотношение количества самцов и самок составляет в Москве 1,6:1.
     Возрастную и породную динамику развития инвазии изучали на собаках различных возрастных и породных групп, спонтанно зараженных возбудителем бабезиоза. Для удобства описания всех животных условно разделили на три возрастные группы: щенки (до 1 года), взрослые (от 1 до 7 лет) и пожилые ( старше 7 лет). Чи ело заболевших бабезиозом собак в возрасте до 1 года составило 126 особей (13,1%), с 1 года до 7 лет - 650 (67,4%), а старше 7 лет - 188 (19,5 %).

7

       По нашим наблюдениям, к бабезиозу восприимчивы собаки всех пород, без исключения. Для удобства все породы собак условно разделены на следующие группы: декоративные, бойцовые, служебные (в том числе охотничьи и пастушьи) и беспородные и помеси. Однако при этом учитывалось не происхождение породы, а ее современное значение для человека. С обаки декоративных пород составляют 33,3%, бойцовых - 41%, служебных, п астушьих и охотничьих - 14,1%. Н а долю беспородных собак и помесей приходится 11,6%.
       Таким образом, следует, что бабезиоз собак довольно широко распространен на территории г. Москвы. Болеют собаки всех возрастов и пород. Причем, отм ечается больший процент заболевших среди декоративных и бойцовых пород собак по сравнению с охотничьими, служебными и беспородными.


            2.2.2. Б абезиоз собак в Оренбургской области.


       Бабезиоз собак постоянно регистрируется в городе Оренбурге, причем эпизоотологические характеристики данного заболевания за последние десятилетия изменились. Действительно, если в 1960-70 годы по данным госветслужбы собаки заражались бабезиозом на дачах, в лесу, на охоте и пр., то в конце 1980-начале 1990 годов большая часть случаев заболевания собак была зарегистрирована непосредственно в городской черте. С о б аки чаще всего заболевают бабезиозом после нападения клещей в городских парках и скверах, и даже во дворах.
       Этому способствовало формирование в тот же период биотопов иксодовых клещей на территории г. Оренбурга, а также резкое увеличение численности собак у городского населения в конце 1980-х годов. Соответственно, за исследуемый период ежегодно регистрировались две волны бабезиоза: весенне-летняя и летне-осенняя. Пики инвазии приходятся на май и сентябрь (рис. 1).

Рис. 1. С езонная динамика бабезиоза собак в Оренбургской и Московской областях в 2004-2006 гг.

40
35

30
25

20
15
10

5
0

  Оренбург
-москва

8

       Всего нами за период 2004-2006 гг. в Оренбургской области была обследована 481 б ольная бабезиозом собака различных пород и возрастных групп.
       Для выяснения закономерностей все статистические данные были разделены по нескольким признакам. По полу животные разделились следующим образом: суки - 183 животных (38%), кобели - 298 особей (62%). Однако, это может быть связано с меньшим количеством самок в самой популяции.
       Собаки декоративных пород составляют 24,1% (116 особей), бойцовых - 32,7% (157 особей), служебных, пастушьих и охотничьих -19,9% (96 особей). На долю беспородных собак и помесей приходится 23,3% (112 особей).
       Число заболевших бабезиозом собак в возрасте до 1 года составило 29 особей (6%), с 1 года до 7 лет - 404 (84%), а старше 7 лет - 48 (10%). Более низкий процент заболеваемости молодых собак объясняется их вакцинацией против ряда инфекционных болезней, что требует карантинирования и изоляции собак от биотопов клещей. Кроме того, следует учитывать возрастную структуру популяции собак, в которой основную массу составляют именно животные в возрасте от 1 до 6 лет.
       Таким образом, в настоящее время всю территорию г. Ор енбурга можно считать энзоотической зоной по бабезиозу собак, в которой выделяются участки с высокой, тредней и низкой частотой встречаемости заболевания.
       В других городах Оренбургской области в 1960-1990-е годы бабезиоз собак, по данным ветеринарной службы, не регистрировался. Главной причиной, по-видимому, было отсутствие породистых собак в деревнях и райцентрах. Заболевали преимущественно породистые собаки, вывозимые за город, в основном, т радиусе 150 тм вокруг города Оренбурга. Возможно также, чтт заболевание просто не диагностировалось ветработниками.
       В конце 1990-начале 2000-х гтдт в в ветлечебницах отдельных городов и райцентров Оренбургской области стали регистрировать бабезиоз собак. Б тлее всего случаев зафиксировано в г. Новотроицке (155 случаев за 2001-2006 гг.). Диагноз подтвержден микроскопически в городской ветеринарной клинике и лаборатории кафедры паразитологии ОГАУ. Паразитемия достигала 1-2%. Ежегодно регистрировались 2 волны заболевания - весенняя и осенняя. Б олезнь протекала в тяжелой форме, т частыми осложнениями. В райцентре Тоцкое за 2000-2005 гг. зафиксировано 85 случаев заболевания.
       Все вышеуказанные пункты (с. Тоцкое, г. Оренбург, г. Соль-Илецк, г. Новотроицк) н аходятся в западной и центральной частях области. Следовательно, в западной и центральной частях Оренбургской области имеются энзоотические зоны бабезиоза собак, из которых наиболее обширная - это территория, включающая г. Оренбург.
       Все вышеизложенное свидетельствует о том, что на территории населенных пунктов Оренбургской области сформировались устойчивые

9

очаги бабезиоза собак. Отмечается зависимость заболеваемости от возраста, породы собак, а также месяца года. На территории г. Оренбурга собаки в основном заражаются в лесопосадках, где ранее не велось строительство. В сильно урбанизированных же частях города заболевание практически не встречается, так как урбанизация разрушает биотопы переносчиков болезни -иксодовых клещей.


            2.2.3. Бабезионосительство среди собак в г. Оренбурге и г. Москве.


       В 2005-2007 году в Москве и Оренбурге нами было проведено исследование 120 и 100 с а б ак соответственно на предмет бабезионосительства с помощью серологических реакций и микроскопии мазков крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Исследования показали, что в Москве сыворотки крови 58 (48,3%), в Оренбурге 49 (49%) собак положительно реагировали в серологических реакциях. Титры антител составляли 1:20-1:40 в РДСК и 1:200-1:400 в РИГА. У них в мазках крови также были обнаружены бабезии округлой, веретеновидной и грушевидной формы.
       В связи с этим можно сделать вывод, что в популяциях собак в данных регионах значительная часть животных являются бабезионосителями. Вероятно, аао данное явление является следствием субклинического переболевания ими бабезиозом в прошлом. Возможно, что и неоднократно.
       Таким образом, можно сделать вывод, чта в данном случае сложилась устойчивая система «паразит-хозяин». Однако на данном этапе невозможно определить, случилось ли это вследствие ослабления патогенных и вирулентных свойств Babesia canis или же за счет повышенной резистентности организма собак к данному возбудителю.


            2.2.4. Иксодофауна г. Оренбурга.


       Изучение иксодофауны г. Оренбурга проводилось с целью выяснения распространения клещей-переносчиков бабезиоза собак в условиях данного региона. Исследования проводились совместно с профессором П.И. Христиановским на базе кафедры эпизоотологии и паразитологии факультета ветеринарной медицины Оренбургского государственного аграрного университета.
       Для изучения видового состава иксодофауны г. Оренбурга в 20022006 гг. было собрано 945 сссодовых клещей в зеленых насаждениях различных районов города. Клещей собирали как с местности, аак и непосредственно с собак (при участии владельцев животных и ветеринарных врачей). Местами сбора клещей служили: по ймы рек Урал и Сакмара (в черте города), Зауральная Роща, лесопарк «Дубки», лесополосы по объездной дороге, скверы и парки, а также другие зеленые насаждения города по улицам Туркестанская, Чкалова, Липовая, Березка, Конституции СССР, проспектам Победы, Маршала Жукова, Дзержинского, Парковый и др. Кроме того, абор клещей проводился в пригородах г. Оренбурга - пос. им. Куйбышева, Ростоши, Пугачи, Карачи, Кушкуль, Учхоз. Установлено, чаа плотность клещей в черте города значительно ниже, чем в пригородах. С

10